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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 发酵罐小试问题
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wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

楼主反馈下试验结果啊
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31楼2012-10-23 17:02:55
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潘瑞冬冬

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我觉得和接种量有关吧 你之前没有优化接种量吗 我优化后在摇瓶中做接种量1%  OD都可以达到20多 你在罐上做OD值怎么会那么低呢？ 我觉得你应该从培养基成分 接种量 等地方找问题哦
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32楼2012-10-23 18:49:35
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potential8707

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
31楼: Originally posted by wt3532 at 2012-10-23 17:02:55
楼主反馈下试验结果啊

我将培养基成分稍微改了下，现在的是玉米浆30g/L，蛋白胨1g/L，富马酸8.3g/L，KH2PO4 2g/L，MgSO4 0.5g/L，加了点消泡剂。发酵温度为37℃，接种量做了两个，一个是0.5%，一个是1%。结果pH都能打到工业上大罐的要求，OD还是不行，接种量为1%的最大只有0.33（之前和现在提到的OD都是稀释50倍后的数据，大罐的也是稀释50倍后至少在0.6以上的），接种量为0.5%最大的有0.35。转数和通气量也是按你说的慢慢增大的，转数从250增加到550rpm，通气量从2.5增加到5.5-6L/min。
OD长不上去是由于营养不够还是接种量不够或是别的什么原因呢
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33楼2012-10-24 17:20:11
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wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

你的蛋白胨加少了，蛋白胨加10g/L或者比这个还高才行，LB培养基中蛋白胨也是1%的啊。另外也可以适量添加点葡萄糖作为速效碳源，不过这个要单独115读灭菌的。

还有磷酸盐好像也少了 你可以随便找点英文大肠杆菌发酵的文献 ，参照你面无机盐的含量
感觉你做的东西  主旨思想应该是利用一些廉价的 玉米浆之类的东西，将富马酸转化成什么别的东西。
如果你只是要菌体的话，没必要用以上的培养基，用基本的营养肉汤培养基或者LB培养基就不错了
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34楼2012-10-25 15:09:09
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wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
zhangxingc: 金币+8, 鼓励持续应助 2013-02-19 18:54:23
这个是网上搜到的一种工业上生产枯草芽孢杆菌的配方：
1、葡萄糖10 g/L、玉米粉8 g/L、豆粕粉25 g/L、硫酸锰30.8 mg/L、硫酸镁5 g/L、磷酸二氢钠0.52 g/L、磷酸氢二钠2.33 g/L

2、马铃薯200 g,蔗糖20 g,葡萄糖10 g,硫酸镁5 g,酵母膏20 g,硫酸锰30.8 mg,磷酸盐缓冲液(磷酸二氢钠0 后面的显示不全

你可以大概上参考一下，然后变换一下： 葡萄糖10g/L 玉米浆 20g/L 硫酸镁 5g/L  磷酸二氢钠0.52 g/L、磷酸氢二钠2.33 g/L 酵母膏或者蛋白胨20 g/L，初始pH调整为7，再添加你的富马酸，结果应该比现在好一点。  （葡萄糖作为速效C源、玉米浆作为慢速或者廉价碳源、磷酸盐可以一定程度上调节pH，不过这个作用可能不是很明显 酵母膏或者蛋白胨可以当做N源，如果工业发酵想降低成本，这个可以用大豆粕代替 培养基还可以改进 比如添加一些Fe盐或者 发酵后期流加 N源 或者 碳源 ，这个就是后期工作了）
还可以添加5g/L是碳酸钙，那个对调节pH有一定帮助
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35楼2012-10-25 15:34:38
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wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

还有接种量是多少的问题，这个相比而言不是特别重要，就是早晚的问题，接种量少了 达到最大值的时间 长点而已。
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36楼2012-10-25 15:36:30
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potential8707

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
35楼: Originally posted by wt3532 at 2012-10-25 15:34:38
这个是网上搜到的一种工业上生产枯草芽孢杆菌的配方：
1、葡萄糖10 g/L、玉米粉8 g/L、豆粕粉25 g/L、硫酸锰30.8 mg/L、硫酸镁5 g/L、磷酸二氢钠0.52 g/L、磷酸氢二钠2.33 g/L

2、马铃薯200 g,蔗糖20 g,葡萄糖1 ...

好的，谢谢，我照着再试下看。
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37楼2012-10-26 10:40:36
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匿名

用户注销 (初入文坛)
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38楼2012-10-26 21:26:42
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QQ614919066

铜虫 (小有名气)
你的OD达不到。是压力小了。你吧压力加大。你看OD上去不。
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又来到上海了。还要投入紧张的工资中，
39楼2013-02-19 09:44:46
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国产粗人

金虫 (初入文坛)
接种量不能随便加大，加大了虽然能减少培养时间，但是可能会影响发酵效果。
转速可以加大到400-700，太大了也不行，生产实现不了没意义的。
空气流量要加大，可以根据生产的通气量换算，再适当多加一点，一般不超过生产的2倍量。
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40楼2013-03-01 21:09:23
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