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wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

楼主反馈下试验结果啊
31楼2012-10-23 17:02:55
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潘瑞冬冬

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我觉得和接种量有关吧 你之前没有优化接种量吗 我优化后在摇瓶中做接种量1%  OD都可以达到20多 你在罐上做OD值怎么会那么低呢? 我觉得你应该从培养基成分 接种量 等地方找问题哦
32楼2012-10-23 18:49:35
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potential8707

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
31楼: Originally posted by wt3532 at 2012-10-23 17:02:55
楼主反馈下试验结果啊

我将培养基成分稍微改了下,现在的是玉米浆30g/L,蛋白胨1g/L,富马酸8.3g/L,KH2PO4 2g/L,MgSO4 0.5g/L,加了点消泡剂。发酵温度为37℃,接种量做了两个,一个是0.5%,一个是1%。结果pH都能打到工业上大罐的要求,OD还是不行,接种量为1%的最大只有0.33(之前和现在提到的OD都是稀释50倍后的数据,大罐的也是稀释50倍后至少在0.6以上的),接种量为0.5%最大的有0.35。转数和通气量也是按你说的慢慢增大的,转数从250增加到550rpm,通气量从2.5增加到5.5-6L/min。
OD长不上去是由于营养不够还是接种量不够或是别的什么原因呢
33楼2012-10-24 17:20:11
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wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

你的蛋白胨加少了,蛋白胨加10g/L或者比这个还高才行,LB培养基中蛋白胨也是1%的啊。另外也可以适量添加点葡萄糖作为速效碳源,不过这个要单独115读灭菌的。

还有磷酸盐好像也少了 你可以随便找点英文大肠杆菌发酵的文献 ,参照你面无机盐的含量
感觉你做的东西  主旨思想应该是利用一些廉价的 玉米浆之类的东西,将富马酸转化成什么别的东西。
如果你只是要菌体的话,没必要用以上的培养基,用基本的营养肉汤培养基或者LB培养基就不错了
34楼2012-10-25 15:09:09
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wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
zhangxingc: 金币+8, 鼓励持续应助 2013-02-19 18:54:23
这个是网上搜到的一种工业上生产枯草芽孢杆菌的配方:
1、葡萄糖10 g/L、玉米粉8 g/L、豆粕粉25 g/L、硫酸锰30.8 mg/L、硫酸镁5 g/L、磷酸二氢钠0.52 g/L、磷酸氢二钠2.33 g/L

2、马铃薯200 g,蔗糖20 g,葡萄糖10 g,硫酸镁5 g,酵母膏20 g,硫酸锰30.8 mg,磷酸盐缓冲液(磷酸二氢钠0 后面的显示不全

你可以大概上参考一下,然后变换一下: 葡萄糖10g/L 玉米浆 20g/L 硫酸镁 5g/L  磷酸二氢钠0.52 g/L、磷酸氢二钠2.33 g/L 酵母膏或者蛋白胨20 g/L,初始pH调整为7,再添加你的富马酸,结果应该比现在好一点。  (葡萄糖作为速效C源、玉米浆作为慢速或者廉价碳源、磷酸盐可以一定程度上调节pH,不过这个作用可能不是很明显 酵母膏或者蛋白胨可以当做N源,如果工业发酵想降低成本,这个可以用大豆粕代替 培养基还可以改进 比如添加一些Fe盐或者 发酵后期流加 N源 或者 碳源 ,这个就是后期工作了)
还可以添加5g/L是碳酸钙,那个对调节pH有一定帮助
35楼2012-10-25 15:34:38
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wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

还有接种量是多少的问题,这个相比而言不是特别重要,就是早晚的问题,接种量少了 达到最大值的时间 长点而已。
36楼2012-10-25 15:36:30
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potential8707

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
35楼: Originally posted by wt3532 at 2012-10-25 15:34:38
这个是网上搜到的一种工业上生产枯草芽孢杆菌的配方:
1、葡萄糖10 g/L、玉米粉8 g/L、豆粕粉25 g/L、硫酸锰30.8 mg/L、硫酸镁5 g/L、磷酸二氢钠0.52 g/L、磷酸氢二钠2.33 g/L

2、马铃薯200 g,蔗糖20 g,葡萄糖1 ...

好的,谢谢,我照着再试下看。
37楼2012-10-26 10:40:36
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匿名

用户注销 (初入文坛)

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38楼2012-10-26 21:26:42
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QQ614919066

铜虫 (小有名气)

你的OD达不到。是压力小了。你吧压力加大。你看OD上去不。
又来到上海了。还要投入紧张的工资中,
39楼2013-02-19 09:44:46
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国产粗人

金虫 (初入文坛)

接种量不能随便加大,加大了虽然能减少培养时间,但是可能会影响发酵效果。
转速可以加大到400-700,太大了也不行,生产实现不了没意义的。
空气流量要加大,可以根据生产的通气量换算,再适当多加一点,一般不超过生产的2倍量。
40楼2013-03-01 21:09:23
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