应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 发酵罐小试问题
412/5返回列表上一页12345下一页
查看: 3108  |  回复: 40
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

345281709-

金虫 (正式写手)
发酵参数的优化是个何很繁琐的工作，慢慢来。
赞一下 回复此楼
质本洁来还洁去
11楼2012-10-17 16:03:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zys1256

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
大肠长到5都成问题，我们大肠随便长长都是一百多的OD
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2012-10-18 18:15:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crayoon

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我觉得接种量不需要加大，这个应该不是主要的原因。你要注意比较发酵过程中大罐和小罐的过程参数的差异，比如OD、pH、DO等能检测的参数的变化趋势，试试从这些参数的差异中能不能找到原因。
赞一下 回复此楼
13楼2012-10-19 08:30:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

potential8707

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by hanjun80 at 2012-10-17 15:29:29
1、你的培养基配方？
2、你的培养工艺？包括搅拌、罐压、补料、pH调控、温度等都需要。
有了上述两个东东，才能给你确切的建议，只有问题，没法回答……

培养基配方：玉米浆3.3%，KH2PO4 0.17%，MgSO4 0.033%，富马酸 0.83%，NaCl 0.2%，接种量 0.033%，有加消泡剂，罐体是玻璃的,pH7.0，温度40-42℃，没有补料，这些都是大罐上的，我照做的，只是把风量和转数提高了
赞一下 回复此楼
14楼2012-10-19 10:31:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

potential8707

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wzq_ing at 2012-10-17 08:37:16
既然知道溶氧，把小罐的溶氧调到和大罐一样，转速风量都增加，但不能只增加一个，因为还要考虑菌承受的剪切力情况，剪切力过大也不利于生长，还有罐压要考虑，跟大罐保持一致，
楼主考虑下六楼说的情况，增加氮源 ...

大罐上没有溶氧电极......转数风量两个都增加了的，我刚做了加大氮源的，结果比以前要稍微好些
赞一下 回复此楼
15楼2012-10-19 10:33:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

potential8707

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by wt3532 at 2012-10-17 10:42:45
溶氧达不到，pH初始设为7吧。转速设的太低了。最高转速设为1000转（大罐转速不能太高是因为剪切力及功率的问题，小罐不存在这个问题），不过不知道你的培养基是什么，防止起泡，要不时加消泡剂，通气量每分钟和发酵 ...

培养基配方见下面的回答，灭菌前就在培养基里加消泡剂了。发酵液体积为3L，通气量设定的为5L/min，会不会大了？昨天将转数提到300rpm，结果比以前稍微好些，可OD还是不达标，罐体是玻璃的。我想着是不是培养基配方就有问题啊
赞一下 回复此楼
16楼2012-10-19 10:38:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dengchun14

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

OD值达不到说明培养条件对菌体有影响，放大的时候转速风量都要按经验公式来放大，比如保持VVm相等，按照搅拌桨线速度放大等等，如果转速过大对菌体伤害较大，应为大肠杆菌还是比较脆弱！另外，看看你的培养基什么的是不是有变化，或者菌种的问题，做下摇瓶实验呢？要从全面考虑小试失败的原因，还有其他很多原因，是否染菌，灭菌温度是否过高破坏培养基，放大是否合理，还有就是设备的检修等等！
赞一下 回复此楼
世界上最遥远的距离，就是你在拍写真照片，而我在拍电镜照片。
17楼2012-10-19 10:58:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dengchun14

金虫 (正式写手)
另外消泡剂是不是加的多了？也有影响的哈
赞一下 回复此楼
世界上最遥远的距离，就是你在拍写真照片，而我在拍电镜照片。
18楼2012-10-19 10:59:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-23 17:05:06
potential8707: 金币+15, ★★★★★最佳答案 2012-10-30 14:47:17
zhangxingc: 回帖置顶 2013-02-19 12:39:13
我不会跟你扯什么公式，根据经验，大肠杆菌转速800-1000转是完全可以的。5L通气也可以，初期刚接种那会通气和转速不用太高。前2-3个小时可以转速200-300，通气适当小点设个2L就可以了，后期根据生长需要慢慢隔1-2小时稍微加大点通气量，同事慢慢100  100的调转速，直到最终转速到1000  ，这个过程只是一个大概的过程。因为你们那边好像没有溶氧电极。
另外大肠杆菌没有那么脆弱，小罐上的拿点剪切力还是可以承受的，楼上的如果没做过大肠杆菌发酵请不要根据自己的想法误导别人
赞一下(3人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

potential8707 potential8707
19楼2012-10-19 13:09:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

看了你的培养基配方了，接种量太少了，发酵罐一般5%-10%接种，0.03%接种不知道是个什么概念。为什么选择40-42℃发酵，会不会是因为大罐的散热系统做的不好，一般大肠杆菌发酵都是37或37以下。培养基中有玉米浆，你怎么确定你的菌浓。
还有一点就是你培养基氮源基本没有，参考别的文献，建议你氮源可以 添加 无机氮源硫酸铵 或者 条件好 添加蛋白胨 或者 氨水 或者 硝酸钾 或者大豆粉。
之前你说你添加氮源，OD好一点了，可能是你的氮源添加的太少了 ，蛋白胨等有机氮源添加 1%的量试一下。
赞一下(1人) 回复此楼
20楼2012-10-19 13:20:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 potential8707 的主题更新
412/5返回列表上一页12345下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +5 Ncdx123456 2026-03-13 6/300 2026-03-15 23:39 by lovewei0727
[考研] 机械专硕调剂 +3 笨笨兔子 2026-03-12 3/150 2026-03-15 20:02 by 栗子粥?
[考研] 070305求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-14 4/200 2026-03-15 11:04 by peike
[考研] 【0703化学调剂】-一志愿华中师范大学-六级475 +5 Becho359 2026-03-11 5/250 2026-03-14 11:35 by 哦哦123
[考研] 求调剂，药学 +3 归零lbm 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:21 by JourneyLucky
[考研] 一志愿安徽大学材料工程专硕313分，求调剂的学校 +8 Yu先生 2026-03-10 10/500 2026-03-14 01:04 by JourneyLucky
[考研] 318求调剂 +3 李新光 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:21 by JourneyLucky
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:06 by 星空星月
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +6 步川酷紫123 2026-03-13 6/300 2026-03-13 21:59 by 星空星月
[硕博家园] 深圳大学硕士招生（2026秋，传感器方向，仅录取第一志愿） +4 xujiaoszu 2026-03-11 7/350 2026-03-13 17:28 by xujiaoszu
[考研] 求b区学校调剂 +3 周56 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:20 by JourneyLucky
[考研] 工科调剂 +4 Jiang191123！ 2026-03-11 4/200 2026-03-13 15:15 by Miko19
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 求调剂 资源与环境 285 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:31 by houyaoxu
[考研] 270求调剂 085600材料与化工专硕 +3 YXCT 2026-03-11 3/150 2026-03-13 10:13 by houyaoxu
[考研] 纺织、生物、化学、材料相关专业招生了 +4 耶耶业 2026-03-09 7/350 2026-03-12 19:05 by Equinoxhua
[考研] 341求调剂 +4 捣蛋猪猪 2026-03-11 4/200 2026-03-12 14:47 by ruiyingmiao
[考研] 化工0817调剂 +8 灿若星晨 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:44 by 星空星月
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭