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potential8707

木虫 (初入文坛)

[求助] 发酵罐小试问题

我做的是大肠杆菌的发酵罐,单位里的大罐已经在生产了,让我做5L的小罐,我也是第一次做,但总是做不到生产上的要求,想在这求助下。
生产上最后发酵液的pH在8.0以上,OD在5.5以上,可我现在将接种量提高了两倍,转数为250 rpm,风量10 SCFH(1 L/min=2.12 SCFH),最后发酵结束后,pH能达标,但是OD远远不行,想问下是不是风量太大了,我下面要怎么改善啊
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大肠杆菌工程菌发酵

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wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-23 17:05:26
溶氧达不到,pH初始设为7吧。转速设的太低了。最高转速设为1000转(大罐转速不能太高是因为剪切力及功率的问题,小罐不存在这个问题),不过不知道你的培养基是什么,防止起泡,要不时加消泡剂,通气量每分钟和发酵液体积比设为1:1或者通气量更高一点也可以。如果是玻璃罐体还要保证罐内压力为一个大气压(玻璃罐体不耐压,不锈钢的应该没多大问题),还有你的OD600怎么会只有5.5,这也太低了吧。拿普通的营养肉汤或者LB都不止这个啊。接种量5%就差不多了。
9楼2012-10-17 10:42:45
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wzq_ing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+4, 鼓励发帖交流问题。 2012-10-16 20:50:14
小罐和大罐是有区别的,
你的大罐条件是什么样的??
一般情况小罐的转速和风量应该是要比大罐高一些
关系到溶氧问题和保温稳定等情况
2楼2012-10-16 12:56:26
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨


amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-10-16 20:50:23
接种量并不是越大越好,有时候菌体量太大反而会抑制菌体生长,保持原样试试。
希望大家多多交流。
3楼2012-10-16 14:30:41
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potential8707

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wzq_ing at 2012-10-16 12:56:26
小罐和大罐是有区别的,
你的大罐条件是什么样的??
一般情况小罐的转速和风量应该是要比大罐高一些
关系到溶氧问题和保温稳定等情况

大罐的转数40rpm,风量400m3/h,我已经提高很多了。溶氧开始在百分之七八十,之后会下降,温度用的跟大罐一样的,41℃。
4楼2012-10-16 15:21:59
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