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bei99209

铜虫 (初入文坛)

[求助] 大分子蛋白做western的条件 已有1人参与

我做大分子蛋白,170kd和220kd,试过湿法转膜,300mA,转膜时间3h,也试过恒压70V,过夜,但都没有显出来,大神们有什么好的建议
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xxdscdx

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2015-02-01 14:58:46
转膜液的配方可以调整一下,比如SDS加多一点,以增加蛋白表面电荷;然后300mA转膜时间液可以延长一下,比如6个小时。我最近在做一个180kD的,特地去咨询过老师,她说她以前转350kD的一个蛋白是这么干的。你还可以多准备几块胶,以备摸索实验条件。
2楼2015-01-31 15:31:55
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