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bei99209

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 大分子蛋白做western的条件已有1人参与

我做大分子蛋白，170kd和220kd，试过湿法转膜，300mA,转膜时间3h，也试过恒压70V,过夜，但都没有显出来，大神们有什么好的建议

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【求助/交流】极小分子与极大分子蛋白的Western Bloting转膜求助！已经有10人回复

1楼 2015-01-31 14:28:44

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xxdscdx

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-02-01 14:58:46

转膜液的配方可以调整一下，比如SDS加多一点，以增加蛋白表面电荷；然后300mA转膜时间液可以延长一下，比如6个小时。我最近在做一个180kD的，特地去咨询过老师，她说她以前转350kD的一个蛋白是这么干的。你还可以多准备几块胶，以备摸索实验条件。

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