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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 310分子量蛋白电泳及转膜条件，希望各位大神给点意见
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一纸小蜜蜂

铜虫 (小有名气)

[求助] 310分子量蛋白电泳及转膜条件，希望各位大神给点意见 已有1人参与

310分子量蛋白电泳用多少浓度胶，转膜条件大概怎么样，求帮忙啊
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1楼 2014-09-15 11:38:19
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wener0405

新虫 (初入文坛)
转印条件：60V恒压3小时，我们以前做300KD的蛋白，没有问题
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10楼2014-09-17 21:28:25
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普通回帖

冉兆星

木虫 (小有名气)
310是什么意思？
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2楼2014-09-15 14:55:09
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一纸小蜜蜂

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 冉兆星 at 2014-09-15 14:55:09
310是什么意思？

310KD
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3楼2014-09-15 18:31:34
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冉兆星

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
一纸小蜜蜂(youlinglyw代发): 金币+3, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-09-16 21:10:23
引用回帖:
3楼: Originally posted by 一纸小蜜蜂 at 2014-09-15 18:31:34
310KD

分子量很大，我看有人用8%的胶跑240KDa，条带在最上面，你可以在减少胶浓度，用6%的试试看，转膜我只做过湿转，觉得可以过夜转移，大概十四五个小时吧！
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4楼2014-09-16 08:28:35
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一纸小蜜蜂

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 冉兆星 at 2014-09-16 08:28:35
分子量很大，我看有人用8%的胶跑240KDa，条带在最上面，你可以在减少胶浓度，用6%的试试看，转膜我只做过湿转，觉得可以过夜转移，大概十四五个小时吧！...

你湿转是个什么条件，我今用的6%的胶
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5楼2014-09-16 10:42:10
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
一纸小蜜蜂(youlinglyw代发): 金币+3, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-09-16 21:10:34
一纸小蜜蜂: 金币+9, ★★★很有帮助, 谢了，我试试看 2014-09-17 09:56:27
你可以配7%的胶跑，7%的胶配制方法，就是6%和8%的胶等体积混
然后转膜300mA转2.5小时
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
6楼2014-09-16 11:22:21
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一纸小蜜蜂

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by gyesang at 2014-09-16 11:22:21
你可以配7%的胶跑，7%的胶配制方法，就是6%和8%的胶等体积混
然后转膜300mA转2.5小时

那么湿转液里加不加SDS呢，还有甲醇是20%不
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7楼2014-09-16 19:26:08
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一纸小蜜蜂

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by gyesang at 2014-09-16 11:22:21
你可以配7%的胶跑，7%的胶配制方法，就是6%和8%的胶等体积混
然后转膜300mA转2.5小时

那么湿转液加SDS不，另外是甲醇20%不
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8楼2014-09-16 19:28:12
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gyesang

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【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 一纸小蜜蜂 at 2014-09-16 19:28:12
那么湿转液加SDS不，另外是甲醇20%不...

湿转buffer就是正常的，不额外加SDS，甲醇是20%，转膜buffer最好是预冷的
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
9楼2014-09-16 20:27:49
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