24小时热门版块排行榜

返回列表

tianti_121

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 321.3
散金: 3
帖子: 165
在线: 55.1小时
虫号: 1526483
注册: 2011-12-06
专业: 微生物学

[求助] 谁知道我这个PCR怎么是这样的啊？该如何调整？已有6人参与

如图，我对乳酸菌进行了菌液PCR出现了这样的结果，请问这是怎么回事？该如何调整？

菌液PCR-20141225.jpg

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

reverse PCR 线性化载体已经有6人回复
引物GC含量高，怎么调整PCR体系？已经有17人回复
ABI的Step one 已经有5人回复
各位有做过差异显示PCR（DDRT-PCR)的吗？已经有11人回复
请问我的菌落PCR测序产物目的片段是什么已经有23人回复
请大神帮我看看我的实时定量PCR结果分析一下失败的原因有图有真相已经有3人回复
荧光定量PCR的相对定量怎么用？已经有5人回复
怎么做实时定量pcr？已经有7人回复
PCR引物GC含量过低时候，如何调整PCR体系？已经有6人回复
用简并引物跑PCR跑不出条带，愁死了已经有24人回复
能否用RT-qPCR试剂盒里做普通的PCR？已经有3人回复
可变剪切体RT-PCR检测的技术问题已经有8人回复
有没有关于植物RT-PCR的详细步骤已经有4人回复
用什么方法去除一个基因中的一段序列已经有11人回复
总dna电泳有条带，但PCR后只有引物二聚体已经有23人回复
求解：实时荧光定量PCR奇峰已经有18人回复
合适的荧光定量PCR管已经有11人回复
这是某种藤状物的果实，有谁知道是什么吗？已经有6人回复
pcr一直不出结果，可以从哪些方面调整已经有13人回复
Taqman实时荧光定量PCR本地信号过强是什么原因？已经有7人回复
荧光定量试剂哪个公司的好啊? 已经有10人回复
pcr目的条带弱，而dimer很亮，怎么调整呢？已经有6人回复
【求助/交流】国产PCR仪怎么样？已经有9人回复
【求助/交流】PCR仪器的使用 -- abi)veriti tm梯度pcr仪已经有14人回复

1楼 2014-12-25 16:12:35

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

puresnowlqin

金虫 (小有名气)

应助: 22 (小学生)
金币: 935.6
散金: 20
红花: 3
帖子: 143
在线: 54.4小时
虫号: 1125785
注册: 2010-10-18
专业: 病原细菌与放线菌生物学

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2014-12-26 16:45:02

菌液ＰＣＲ容易出现很多杂质，可以提个基因组然后再ＰＣＲ会好很多。

赞一下(1人)

回复此楼

最喜欢的就是最好的。

2楼2014-12-25 16:42:27

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

MolEPI: 1
应助: 172 (高中生)
金币: 646.4
散金: 170
红花: 16
帖子: 863
在线: 144.9小时
虫号: 3603131
注册: 2014-12-19
专业: 抗体工程学

【答案】应助回帖

★ ★ ★
tianti_121(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-01-16 17:34:00

您好你的图上显示的结果是拖尾太严重啦我认为可能的原因是
1）模板：反应体系中的模板量太浓了，而且不纯吧，(菌液直接PCR应该不行的)，可能会造成拖带
2）buffer：buffer一般酶问题的，只要合适就行
3）退火温度：不知道您的退火温度是多少呢，普通Taq酶或者是热启动酶55℃就可以了（可以适当提高的）
4）酶：酶是关键，但是你的这个实验结果来看，酶应该是酶问题的，（酶的用量不要太多哦）
5）循环次数30个循环即可不能太多
原因一个一个分析总会得到结果哒希望对你有帮助

赞一下(1人)

回复此楼

todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful

8楼2015-01-07 10:36:00

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖