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tianti_121

新虫 (小有名气)

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[求助] 谁知道我这个PCR怎么是这样的啊？该如何调整？已有6人参与

如图，我对乳酸菌进行了菌液PCR出现了这样的结果，请问这是怎么回事？该如何调整？

菌液PCR-20141225.jpg

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1楼 2014-12-25 16:12:35

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木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
tianti_121(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-01-16 17:34:00

您好你的图上显示的结果是拖尾太严重啦我认为可能的原因是
1）模板：反应体系中的模板量太浓了，而且不纯吧，(菌液直接PCR应该不行的)，可能会造成拖带
2）buffer：buffer一般酶问题的，只要合适就行
3）退火温度：不知道您的退火温度是多少呢，普通Taq酶或者是热启动酶55℃就可以了（可以适当提高的）
4）酶：酶是关键，但是你的这个实验结果来看，酶应该是酶问题的，（酶的用量不要太多哦）
5）循环次数30个循环即可不能太多
原因一个一个分析总会得到结果哒希望对你有帮助