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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量PCR阴性对照有扩增
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hero352

金虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量PCR阴性对照有扩增 已有1人参与

rt-qpcr阴性对照有扩增峰，溶解曲线显示TM 84, 更换了新的mix ，引物，水重新做还是这样的结果，可能是什么原因呢
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1楼 2014-12-21 15:41:22
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wyzl2007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引物特异性 是否经过验证？？？
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2楼2014-12-21 20:24:05
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hero352

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wyzl2007 at 2014-12-21 20:24:05
引物特异性 是否经过验证？？？

普通PCR后电泳验证显示单一条带，
何况就是不特异，模板是水，不应该有扩增吧，
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3楼2014-12-21 21:18:51
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wyzl2007

金虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-22 22:56:14
引用回帖:
3楼: Originally posted by hero352 at 2014-12-21 21:18:51
普通PCR后电泳验证显示单一条带，
何况就是不特异，模板是水，不应该有扩增吧，...

这种现象 其实不罕见的，你用的是sybrgreen染色，本来这种方法特异性就不强
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4楼2014-12-22 09:48:39
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zhanghl_

新虫 (初入文坛)
如果ct值大于35，可以认为是没有扩增的
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5楼2014-12-27 09:19:31
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lixinumone

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zhanghl_ at 2014-12-27 09:19:31
如果ct值大于35，可以认为是没有扩增的

那如果Ct值没有大于35呢？
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6楼2015-07-04 16:26:18
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