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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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hero352

版主

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[求助] 荧光定量PCR阴性对照有扩增 已有1人参与

rt-qpcr阴性对照有扩增峰,溶解曲线显示TM 84, 更换了新的mix ,引物,水重新做还是这样的结果,可能是什么原因呢
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wyzl2007

兑换贵宾

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引物特异性 是否经过验证???
2楼2014-12-21 20:24:05
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hero352

超级版主

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引用回帖:
2楼: Originally posted by wyzl2007 at 2014-12-21 20:24:05
引物特异性 是否经过验证???

普通PCR后电泳验证显示单一条带,
何况就是不特异,模板是水,不应该有扩增吧,
3楼2014-12-21 21:18:51
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wyzl2007

兑换贵宾

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-22 22:56:14
引用回帖:
3楼: Originally posted by hero352 at 2014-12-21 21:18:51
普通PCR后电泳验证显示单一条带,
何况就是不特异,模板是水,不应该有扩增吧,...

这种现象 其实不罕见的,你用的是sybrgreen染色,本来这种方法特异性就不强
4楼2014-12-22 09:48:39
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zhanghl_

实习版主

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如果ct值大于35,可以认为是没有扩增的
5楼2014-12-27 09:19:31
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lixinumone

兑换贵宾

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引用回帖:
5楼: Originally posted by zhanghl_ at 2014-12-27 09:19:31
如果ct值大于35,可以认为是没有扩增的

那如果Ct值没有大于35呢?
6楼2015-07-04 16:26:18
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