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odelay

铜虫 (小有名气)

[交流] 酶切的大小两个片段连接转化涂板后没有长出菌落,是为什么啊

酶切的大小两个片段连接转化涂板后没有长出菌落,是为什么啊
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秋雨晗晨

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
一般按照摩尔比是10:1(片段:载体)
5楼2014-12-22 10:53:05
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董博士

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-12-18 16:28:06
两个片段可能没连接吧上,一般是连接的两片段的比例不合适,也可能是感受态不行,或者板子抗性有问题,转化一般要做阳性和阴性对照,要排除板子,质粒,或者是感受态细胞的问题
医学&统计学
2楼2014-12-18 12:54:56
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odelay

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 董博士 at 2014-12-18 12:54:56
两个片段可能没连接吧上,一般是连接的两片段的比例不合适,也可能是感受态不行,或者板子抗性有问题,转化一般要做阳性和阴性对照,要排除板子,质粒,或者是感受态细胞的问题

比例一般是多少啊梁片段
3楼2014-12-18 21:24:52
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gangouyang

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-12-20 23:28:33
这要取决于你的insert和vector的浓度了,在电泳完之后,胶上看到条带的亮度就能比较出来,如果是等浓度的话,就1:1连。如果不是,浓的少加,稀的多加,浓:稀=1:5或者1:7,连2个不同比例的试试看,或许就能连出来。
4楼2014-12-18 22:12:43
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