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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶切的大小两个片段连接转化涂板后没有长出菌落，是为什么啊
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odelay

铜虫 (小有名气)

[交流] 酶切的大小两个片段连接转化涂板后没有长出菌落，是为什么啊

酶切的大小两个片段连接转化涂板后没有长出菌落，是为什么啊
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1楼 2014-12-18 10:39:08
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董博士

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-12-18 16:28:06
两个片段可能没连接吧上，一般是连接的两片段的比例不合适，也可能是感受态不行，或者板子抗性有问题，转化一般要做阳性和阴性对照，要排除板子，质粒，或者是感受态细胞的问题
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医学&统计学
2楼2014-12-18 12:54:56
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odelay

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 董博士 at 2014-12-18 12:54:56
两个片段可能没连接吧上，一般是连接的两片段的比例不合适，也可能是感受态不行，或者板子抗性有问题，转化一般要做阳性和阴性对照，要排除板子，质粒，或者是感受态细胞的问题

比例一般是多少啊梁片段
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3楼2014-12-18 21:24:52
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gangouyang

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-12-20 23:28:33
这要取决于你的insert和vector的浓度了，在电泳完之后，胶上看到条带的亮度就能比较出来，如果是等浓度的话，就1:1连。如果不是，浓的少加，稀的多加，浓：稀=1：5或者1:7，连2个不同比例的试试看，或许就能连出来。
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4楼2014-12-18 22:12:43
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秋雨晗晨

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一般按照摩尔比是10:1（片段：载体）
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5楼2014-12-22 10:53:05
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甲方不怕乙方

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
仔细阅读你所用载体的说明书 里面又说明模版片段和载体量的比例使用说明的

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我要让你的生活因为有我而更精彩
6楼2014-12-22 12:23:05
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