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kjchao0316

新虫 (初入文坛)

[交流] 纯化后蛋白没有活性 已有4人参与

最近纯化一个蛋白,大小35KD左右,蛋白是包涵体表达,洗涤后经SDS-PAGE验证蛋白大小和纯度都不是问题,但是不论用8M尿素、Tris-NaOH、0.5%SLS溶解后测活性,基本没活性,求教应该怎么处理
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
摸索表达条件,尽量活性表达在上清液。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2014-12-25 22:16:44
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小小cool

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
包涵体肯定没有活性的,需要复性

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2014-12-16 18:52:31
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成都连接流体

新虫 (正式写手)

稷安生物超哥?
3楼2014-12-25 17:35:07
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kjchao0316

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小小cool at 2014-12-16 18:52:31
包涵体肯定没有活性的,需要复性

复兴后也没有活性,变性条件下向让蛋白的作用表位都暴露,但是和目的片段已然没有活性
5楼2014-12-31 13:20:32
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