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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于纯化蛋白活性的问题~我把蛋白放在-20°会失火吗
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zoeye

金虫 (小有名气)

[求助] 关于纯化蛋白活性的问题~我把蛋白放在-20°会失火吗

最近在纯蛋白
先诱导然后跑PAGE胶的
就把蛋白放在冰箱-20°了 我是要检测蛋白活性的
放在-20°的蛋白会失活吗？
那如果我想隔天纯化的话 蛋白要怎么保存啊

谢谢解答
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1楼 2012-02-26 19:51:40
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
加20%的甘油-20度保存。
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2楼2012-02-26 21:15:21
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
隔天使用的话4度保存就可以了
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3楼2012-02-26 23:30:18
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137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+1): 鼓励应助 2012-02-27 13:40:27
低温下，水容易形成尖锐的冰晶，会刺入蛋白内部，进而影响蛋白活性。长期保存，应注意防冻，短期，直接在4度就行。常见的例子就是：我们做PCR或者酶切所与用的酶，都是蛋白质，为了保留期活性，在—20度却不会结冰，因为保护液中有甘油。
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总有一天我要修改用户名。
4楼2012-02-27 11:58:36
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蛋白放-20最好加些保护剂，如果想隔天纯化最好是将菌体离心后获得的菌饼放在-20冷冻或者将破碎的细胞裂解液冷冻起来
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5楼2012-02-27 12:58:56
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落满夏天

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般不会,注意最好不要反复冻融,这个容易失活.
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星星之火，可以燎原
6楼2012-02-27 15:07:37
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东方龙飞

铜虫 (正式写手)
在我看来，长期保存，副二十度肯定是没有问题的，基本上一周都没有任何问题，而且不需要有甘油（前提是细胞壁未破）。如果破壁了，最好还是有甘油保存。一般四度保存几天还是问题不大的
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7楼2012-02-27 21:51:01
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馋猫

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
zoeye(金币+1): ★有帮助 2012-02-28 16:47:05
未破碎的时候可以直接放-20.破碎之后应该纯化做完，可以在4度短期保存
或者-80度保存后冰上溶解
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8楼2012-02-28 15:45:08
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