应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】蛋白纯化问题！
61/1返回列表
查看: 1131  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

chunmeiyang

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】蛋白纯化问题！ 已有3人参与

大家帮忙分析一下吧
我用很久以前保的菌纯化蛋白，发现蛋白量相对以前减少了（我的蛋白是GST标签的），而且纯化出来GST的量大概是蛋白的两倍，比以前增多约三四倍，所以我重新提取质粒，重新做了一次转化，但是纯化出来的蛋白还是跟以前一样，没有改善。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-10-27 10:15:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoenwen

金虫 (小有名气)
可能发生变异了。
回复此楼
2楼2010-10-27 13:46:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★
1949stone(金币+2):有见地 2010-10-27 13:55:17
呵呵，这个问题很常见的，不同克隆之间都是有差异的，有的克隆表达量高，有的克隆虽然也表达，但是量可能就少很多。我们一般都是经过两轮克隆筛选的，然后保存表达高的克隆进行冻存，这样将来你的表达量既高且很稳定。

祝好运
赞一下(1人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
3楼2010-10-27 13:51:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chunmeiyang

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-10-27 13:51:49:
呵呵，这个问题很常见的，不同克隆之间都是有差异的，有的克隆表达量高，有的克隆虽然也表达，但是量可能就少很多。我们一般都是经过两轮克隆筛选的，然后保存表达高的克隆进行冻存，这样将来你的表达量既高且很稳 ...

“两轮克隆筛选”是指转化两次吗？能具体说说吗？谢谢你！
赞一下 回复此楼
4楼2010-10-27 20:56:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by chunmeiyang at 2010-10-27 20:56:01:

“两轮克隆筛选”是指转化两次吗？能具体说说吗？谢谢你！

不是的，呵呵，我给你提供一篇文献你看看，里面有 double selection for high-level expression，发表在 protein science 上的，practical protocols for production of very。。。

链接如下：
http://www.proteinscience.org/de ... ant_proteins_u.html
赞一下(1人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
5楼2010-10-28 09:11:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chunmeiyang

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-10-28 09:11:15:



不是的，呵呵，我给你提供一篇文献你看看，里面有 double selection for high-level expression，发表在 protein science 上的，practical protocols for production of very。。。

链接如下：
[url]ht ...

谢谢你！！
回复此楼
6楼2010-10-28 15:27:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 chunmeiyang 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +6 生物工程调剂 2026-03-17 10/500 2026-03-22 20:22 by edmund7
[考研] 284求调剂 +5 Zhao anqi 2026-03-22 5/250 2026-03-22 17:38 by barlinike
[考研] 287求调剂 +8 晨昏线与星海 2026-03-19 9/450 2026-03-22 17:01 by i_cooler
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 354求调剂 +7 Tyoumou 2026-03-18 10/500 2026-03-22 11:11 by 人来盛
[考研] 材料工程专硕 348分求调剂 +3 冬辞. 2026-03-17 5/250 2026-03-21 18:47 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分，一志愿四川大学，诚心求调剂 +11 吃吃吃才有意义 2026-03-19 11/550 2026-03-21 18:23 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +10 慕寒mio 2026-03-16 10/500 2026-03-19 15:26 by 丁丁*
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭