应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求助关于蛋白纯化的问题！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 1188  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lxyyzz

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求助关于蛋白纯化的问题！ 已有5人参与

纯化的蛋白分子量大概25KDa, 纯化效果还可以，但是透析浓缩后再跑胶，目标条带就看不见了，有哪位高人遇到类似的问题没有？这个是怎么回事？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-06-26 14:09:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zemin_fang

木虫 (正式写手)
★
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-06-26 14:31:37
lxyyzz(金币+1):谢谢 2010-06-26 14:39:17
你用的透析袋的截留分子量上限是多少？你的估计要用上限是10kd的
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-06-26 14:19:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxyyzz

木虫 (小有名气)
用的透析袋截留分子量是14kDa,这个应该可以的吧。。。
赞一下 回复此楼
3楼2010-06-26 14:39:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaojc

木虫 (正式写手)
纯化后电泳检测了没有，浓缩之后跑胶的电压大小，电泳时间长短，分离胶的浓度。要考虑是否已经跑出去了，毕竟25KD不是很大
赞一下 回复此楼
专注、专心、专业
4楼2010-06-26 16:34:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaojc

木虫 (正式写手)
★
dhd997(金币+1):有道理。谢谢交流。 2010-06-26 16:38:28
lxyyzz(金币+1):纯化后的电泳很正常。不会是跑出去了。MARKER的条带都还在啊 2010-06-26 20:32:34
纯化后电泳检测了没有，浓缩之后跑胶的电压大小，电泳时间长短，分离胶的浓度。要考虑是否已经跑出去了，毕竟25KD不是很大
赞一下(1人) 回复此楼
专注、专心、专业
5楼2010-06-26 16:35:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

purplerain2586

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
amisking(金币+3):最近比较活跃，鼓励一下。 2010-06-26 19:15:52
lxyyzz(金币+1):但是浓缩后的蛋白酶活还在，应该不会是跑出去了啊。不明白怎么回事 2010-06-26 20:33:10
怀疑是不是超滤膜截留分子量跟你的分子量差得不远，厂家又偷工减料，把膜孔弄大了一点，蛋白质哧溜一下就跑出去了。建议再选择一下超滤膜。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-06-26 17:39:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxyyzz

木虫 (小有名气)
这个蛋白虽然看不到条带，可是测酶活还是有的啊。真不知道是怎么回事了。。。
赞一下 回复此楼
7楼2010-06-26 20:47:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mofashishe

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-06-26 23:19:34
lxyyzz(金币+2):恩。是考染的。谢谢哈，我考虑换换透析袋看看 2010-06-28 10:42:08
引用回帖:
Originally posted by lxyyzz at 2010-06-26 20:47:41:
这个蛋白虽然看不到条带，可是测酶活还是有的啊。真不知道是怎么回事了。。。

请问楼主你是用什么染色的，是考染还是银染啊，考染的话是不灵敏度不够所以没看见有条带啊。

以前我买超滤膜的时候业务员说是要选择分子量一半以下的，估计14Kda的膜蛋

白不会全部都跑出去的，但应该剩下不多，如果考染就会没带。

酶活灵敏度比考染要高的。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2010-06-26 22:46:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lxyyzz 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 285求调剂 +8 AZMK 2026-04-04 11/550 2026-04-06 13:56 by BruceLiu320
[考研] 320分人工智能调剂 +8 振—TZ 2026-04-03 8/400 2026-04-05 22:33 by 范式思维
[考研] 377求调剂 +6 by.ovo 2026-04-05 6/300 2026-04-05 22:18 by dongzh2009
[考研] 复试调剂 +8 春日来信- 2026-04-03 8/400 2026-04-05 18:58 by 蓝云思雨
[考研] 326求调剂 +3 顾若浮生 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:32 by 蓝云思雨
[有机交流] 甲醇/二氯 1:15过柱子 5+3 a哎y呦w喂 2026-03-31 3/150 2026-04-05 10:42 by 88817753
[考研] 一志愿江南大学085501机械工程专硕326分，本科佳木斯大学 +5 顾若浮生 2026-04-03 9/450 2026-04-05 09:57 by 1753564080
[考研] 材料化工306分找合适调剂 +14 沧海轻舟e 2026-04-04 14/700 2026-04-05 09:53 by 朱云虎202
[考研] 344材料与化工调剂 +9 调剂上岸玘 2026-04-03 9/450 2026-04-04 23:10 by happyddm
[考研] 材料与化工306分找调剂 +23 沧海轻舟e 2026-04-02 27/1350 2026-04-04 21:52 by laoshidan
[考研] 296材料专硕求调剂 +21 202451007219 2026-04-02 22/1100 2026-04-04 21:48 by hemengdong
[考研] 一志愿0817化学工程与技术，求调剂 +24 我不是只因 2026-04-02 28/1400 2026-04-04 15:15 by dongzh2009
[考研] 英一数一408，总分284，二战真诚求调剂 +13 12.27 2026-03-30 15/750 2026-04-03 14:41 by 氮气气气
[考研] 数一英一285求调剂 +7 AZMK 2026-04-03 9/450 2026-04-03 13:03 by ms629
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +6 崔wj 2026-04-02 6/300 2026-04-03 10:19 by 蓝云思雨
[考研] 22408 266求调剂 +3 masss11222 2026-04-02 3/150 2026-04-02 18:11 by 笔落锦州
[考研] 318求调剂 +3 笃行致远. 2026-03-31 4/200 2026-04-02 15:56 by Jaylen.
[考研] 310分求调剂 +4 成功上岸wang 2026-04-01 4/200 2026-04-01 20:35 by liu823948201
[考研] 085600 一志愿9 总分351 求调剂学校 +7 czhcz 2026-03-31 9/450 2026-04-01 19:24 by 无际的草原
[考研] 267求调剂 +13 uiybh 2026-03-31 13/650 2026-04-01 10:25 by 探123
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭