应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】凝血酶切割GST-tag 求助！
141/2返回列表12下一页
查看: 3053  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

chunmeiyang

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】凝血酶切割GST-tag 求助！ 已有9人参与

我纯化出带GST标签的融合蛋白，用凝血酶切割后，蛋白是跟GST分开了，但蛋白都沉淀了，请问一下，这是怎么回事啊，大家有没有谁做过？有没有遇到过此类问题啊？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-08-24 10:33:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

月月大可

木虫 (著名写手)
buffer可能不合适，考虑更换buffer

或者就不要切了
赞一下 回复此楼
2楼2010-08-24 18:12:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chunmeiyang

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 月月大可 at 2010-08-24 18:12:56:
buffer可能不合适，考虑更换buffer

或者就不要切了

我这个必须切，要不然会对酶活有影响的，我用的buffer是PBS，应该不会使蛋白沉淀吧
赞一下 回复此楼
3楼2010-08-24 18:46:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

月月大可

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看看 从纯化到星辰 ，上面有对buffer说明的地方
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-08-25 11:14:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chunmeiyang

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 月月大可 at 2010-08-25 11:14:43:
看看 从纯化到星辰 ，上面有对buffer说明的地方

请问什么叫“从纯化到星辰”？
赞一下 回复此楼
5楼2010-08-25 16:40:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

月月大可

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by chunmeiyang at 2010-08-25 16:40:52:

请问什么叫“从纯化到星辰”？

百度  Google都可以，马上看到答案
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-08-25 17:06:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by chunmeiyang at 2010-08-25 16:40:52:

请问什么叫“从纯化到星辰”？

牛人的经典纯化文章啊，

具体你用的酶切条件是什么？
赞一下 回复此楼
7楼2010-08-25 17:40:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chunmeiyang

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by jasco at 2010-08-25 17:40:59:


牛人的经典纯化文章啊，

具体你用的酶切条件是什么？

让带GST标签的融合蛋白先接到柱子上，然后取出树脂，加入凝血酶溶液（40ul凝血酶+960ulPBS）, 22度于摇床轻轻摇动16小时
赞一下 回复此楼
8楼2010-08-26 11:15:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2009227004

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by chunmeiyang at 2010-08-26 11:15:53:
让带GST标签的融合蛋白先接到柱子上，然后取出树脂，加入凝血酶溶液（40ul凝血酶+960ulPBS）, 22度于摇床轻轻摇动16小时

你好，请问一下，你这个加入的凝血酶的浓度或者是酶活单位是怎么算的。还有，如果表达的蛋白在22度容易变性怎么办？

[ Last edited by 2009227004 on 2011-5-8 at 12:17 ]
赞一下(1人) 回复此楼
当别人都在假装正经的时候，我就假装不正经。
9楼2011-05-08 12:15:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王会征

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5): 给个红包，谢谢回帖
沉淀也算正常啊，GST有增溶作用啊
赞一下 回复此楼
10楼2012-03-12 21:33:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 chunmeiyang 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 生生命学部会评 +3 wuke100666 2026-07-15 3/150 2026-07-15 17:11 by kingkocxr
[基金申请] E口会评 +11 布布和一二 2026-07-13 13/650 2026-07-15 16:34 by Kittylucky
[基金申请] E口青C会评结束了吗？ 40+3 小小书虫c 2026-07-14 9/450 2026-07-15 16:04 by 安静的知了
[基金申请] 会评 +3 无名者登山 2026-07-15 3/150 2026-07-15 14:45 by Vivilian
[基金申请] 生命口C13面上会评时间 +6 luckinging 2026-07-14 9/450 2026-07-15 14:39 by 雨冰共舞
[教师之家] 内心匮乏 +13 水冰月月野兔 2026-07-12 13/650 2026-07-15 14:21 by jiduquegai
[文学芳草园] 你可曾有过这种感受？ +3 Jeanya 2026-07-09 6/300 2026-07-15 11:07 by mbtwt
[论文投稿] 农业机械学报投稿周期 +3 G0DLIN 2026-07-14 7/350 2026-07-15 09:26 by xs74101122
[基金申请] 国自然面上D口祈祷 +4 monkeynana 2026-07-14 4/200 2026-07-15 09:14 by 白水煮
[论文投稿] 跨出版社商投稿 20+4 倪好520 2026-07-13 4/200 2026-07-15 08:35 by bobvan
[基金申请] 没收到消息，再次陪跑 +3 天空星辰fly 2026-07-14 3/150 2026-07-14 19:14 by 6543yes
[基金申请] 不要再数国自然申请书的 filecode 的分隔符个数了 +13 sadpencil 2026-07-12 20/1000 2026-07-14 13:12 by 杠就是你对
[基金申请] 明天E口面上会评 +8 布布和一二 2026-07-12 9/450 2026-07-13 22:59 by QTSorange
[论文投稿] MSER送审了还被拒稿 +4 S778950906 2026-07-08 6/300 2026-07-13 16:22 by tfang
[基金申请] 祈祷青基必中 50+6 hadengry 2026-07-09 16/800 2026-07-12 20:31 by 登山虫虫
[考博] 27届辽宁大学应届毕业生申博 +3 可乐微风大海 2026-07-09 3/150 2026-07-10 21:23 by 贪玩的研究僧
[基金申请] 关于如何从代码看上不上会 +17 且听虎啸 2026-07-09 23/1150 2026-07-10 19:51 by sdfapple719
[有机交流] chemdraw 20+5 ?慕鱼? 2026-07-08 6/300 2026-07-10 15:37 by 紫枫星域
[基金申请] b口会评 +6 当空照 2026-07-08 6/300 2026-07-09 20:49 by tonyliu0401
[考研] 在职考研 +6 wu5d 2026-07-08 7/350 2026-07-09 16:40 by 化工小霸王呀
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭