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dengxuepeng

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于固定化凝血酶活性测定 已有2人参与

求高手:
        最近做固定化凝血酶研究,是使用聚丙烯酰胺凝胶包埋法制备的,测定酶活性是使用的发色底物S-2238,游离酶和底物混合后立即产生了颜色变化,但固定化后很长时间也没有什么变化,这是为什么呢?包埋法制备固定化酶不是酶活力损失比较少吗?就是有损失也应该有颜色变化啊,那位高手指点一下,不胜感激。
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在工作中享受生活。
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lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
dengxuepeng(金币+5):谢谢参与
scelab(金币+1):high hand~ :tiger23: 2010-11-05 23:52:04
引用回帖:
Originally posted by dengxuepeng at 2010-11-05 18:04:15:
求高手:
        最近做固定化凝血酶研究,是使用聚丙烯酰胺凝胶包埋法制备的,测定酶活性是使用的发色底物S-2238,游离酶和底物混合后立即产生了颜色变化,但固定化后很长时间也没有什么变化,这是为什么呢?包 ...

第一,你的固定化的enzyme loading capacity为多少?会不会造成酶没有包埋?
第二,包埋对酶活造成的影响更多的在于diffusion。你制备方法会不会造成强烈的diffusion limitation?
2楼2010-11-05 23:34:58
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qzx327

木虫 (著名写手)


dengxuepeng(金币+5):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by dengxuepeng at 2010-11-05 18:04:15:
求高手:
        最近做固定化凝血酶研究,是使用聚丙烯酰胺凝胶包埋法制备的,测定酶活性是使用的发色底物S-2238,游离酶和底物混合后立即产生了颜色变化,但固定化后很长时间也没有什么变化,这是为什么呢?包 ...

我是来请教的,请教包埋这一方法,具体怎么做?
3楼2010-11-09 15:24:52
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dengxuepeng

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by qzx327 at 2010-11-09 15:24:52:

我是来请教的,请教包埋这一方法,具体怎么做?

我做的不好,惭愧!
在工作中享受生活。
4楼2010-11-12 12:17:25
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zjlshsh

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
没法包,固定化凝血酶只是一些学者在实验室闹着玩的,大生产没有成功的
5楼2013-01-06 13:16:45
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