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dengxuepeng

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[交流] 【求助/交流】关于固定化凝血酶活性测定已有2人参与

求高手：
最近做固定化凝血酶研究，是使用聚丙烯酰胺凝胶包埋法制备的，测定酶活性是使用的发色底物S-2238，游离酶和底物混合后立即产生了颜色变化，但固定化后很长时间也没有什么变化，这是为什么呢？包埋法制备固定化酶不是酶活力损失比较少吗？就是有损失也应该有颜色变化啊，那位高手指点一下，不胜感激。

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在工作中享受生活。

1楼 2010-11-05 18:04:15

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lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)

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dengxuepeng(金币+5):谢谢参与
scelab(金币+1):high hand~ :tiger23: 2010-11-05 23:52:04

引用回帖:

Originally posted by dengxuepeng at 2010-11-05 18:04:15:
求高手：
最近做固定化凝血酶研究，是使用聚丙烯酰胺凝胶包埋法制备的，测定酶活性是使用的发色底物S-2238，游离酶和底物混合后立即产生了颜色变化，但固定化后很长时间也没有什么变化，这是为什么呢？包 ...

第一，你的固定化的enzyme loading capacity为多少？会不会造成酶没有包埋？
第二，包埋对酶活造成的影响更多的在于diffusion。你制备方法会不会造成强烈的diffusion limitation？