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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于固定化凝血酶活性测定
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dengxuepeng

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于固定化凝血酶活性测定 已有2人参与

求高手：
        最近做固定化凝血酶研究，是使用聚丙烯酰胺凝胶包埋法制备的，测定酶活性是使用的发色底物S-2238，游离酶和底物混合后立即产生了颜色变化，但固定化后很长时间也没有什么变化，这是为什么呢？包埋法制备固定化酶不是酶活力损失比较少吗？就是有损失也应该有颜色变化啊，那位高手指点一下，不胜感激。
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在工作中享受生活。
1楼 2010-11-05 18:04:15
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qzx327

木虫 (著名写手)
★
dengxuepeng(金币+5):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by dengxuepeng at 2010-11-05 18:04:15:
求高手：
        最近做固定化凝血酶研究，是使用聚丙烯酰胺凝胶包埋法制备的，测定酶活性是使用的发色底物S-2238，游离酶和底物混合后立即产生了颜色变化，但固定化后很长时间也没有什么变化，这是为什么呢？包 ...

我是来请教的，请教包埋这一方法，具体怎么做？
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3楼2010-11-09 15:24:52
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lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
dengxuepeng(金币+5):谢谢参与
scelab(金币+1):high hand~ :tiger23: 2010-11-05 23:52:04
引用回帖:
Originally posted by dengxuepeng at 2010-11-05 18:04:15:
求高手：
        最近做固定化凝血酶研究，是使用聚丙烯酰胺凝胶包埋法制备的，测定酶活性是使用的发色底物S-2238，游离酶和底物混合后立即产生了颜色变化，但固定化后很长时间也没有什么变化，这是为什么呢？包 ...

第一，你的固定化的enzyme loading capacity为多少？会不会造成酶没有包埋？
第二，包埋对酶活造成的影响更多的在于diffusion。你制备方法会不会造成强烈的diffusion limitation？
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2楼2010-11-05 23:34:58
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dengxuepeng

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by qzx327 at 2010-11-09 15:24:52:

我是来请教的，请教包埋这一方法，具体怎么做？

我做的不好，惭愧！
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在工作中享受生活。
4楼2010-11-12 12:17:25
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zjlshsh

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
没法包，固定化凝血酶只是一些学者在实验室闹着玩的，大生产没有成功的
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5楼2013-01-06 13:16:45
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