应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 斑马鱼胚胎整体原位杂交问题求助！
81/1返回列表
查看: 1888  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

so_what

无虫 (初入文坛)

[求助] 斑马鱼胚胎整体原位杂交问题求助！

我做的是RNA原位杂交的，用的24hpf的鱼，做了2次，最后显色的时候发现胚胎都碎了，求助各位高人这是由哪些原因引起的，有点纠结啊，谢谢大家指点啊。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-04-12 16:59:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

curie

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励帮助解答，欢迎继续交流。 2012-04-12 19:48:21
你是用什么方法做的RNA原位杂交？这对RNA量要求很高吧。 现在Affymetrix的ViewRNA很方便做原位，对RNA的量要求也很低，但价格稍贵……
赞一下 回复此楼
2楼2012-04-12 17:28:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

so_what

无虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by curie at 2012-04-12 17:28:50:
你是用什么方法做的RNA原位杂交？这对RNA量要求很高吧。 现在Affymetrix的ViewRNA很方便做原位，对RNA的量要求也很低，但价格稍贵……

RNA要求现在不是问题，但发现现在胚胎都碎了，尴尬了
赞一下 回复此楼
3楼2012-04-12 18:06:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

GOLAN

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蛋白酶消化时间短一点，浓度放低点试试
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2012-04-15 18:28:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

so_what

无虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by GOLAN at 2012-04-15 18:28:52:
蛋白酶消化时间短一点，浓度放低点试试

嗯 我试试 谢谢
回复此楼
5楼2012-04-16 09:53:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

so_what

无虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by GOLAN at 2012-04-15 18:28:52:
蛋白酶消化时间短一点，浓度放低点试试

补充下，我用的蛋白酶浓度是10ug/ml，处理了3分钟 不知道有没有问题
赞一下 回复此楼
6楼2012-04-16 10:34:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjn310

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by GOLAN at 2012-04-15 18:28:52
蛋白酶消化时间短一点，浓度放低点试试

1我想检测斑马鱼的??(原位杂交到底是干什么用的,是用来检测斑马鱼有没有什么基因吗,这里能具体说说吗,那检测出来的话具体应用是什么,应用到其他生物上说明什么呢)，用原位杂交的方法，那我必须得先构建探针是吧 2我看好多探针都是通用的，这是什么原理啊，不是每种基因对应的序列不一样吗，那怎么会有什么公共探针和探针库的概念呢(我 3要检测的序列是已知的还是未知的呢,如果是未知的那探针怎么个合成法(没有序列怎么合成探针)
赞一下 回复此楼
7楼2012-10-06 15:21:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

GOLAN

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by cjn310 at 2012-10-06 15:21:29
1我想检测斑马鱼的??(原位杂交到底是干什么用的,是用来检测斑马鱼有没有什么基因吗,这里能具体说说吗,那检测出来的话具体应用是什么,应用到其他生物上说明什么呢)，用原位杂交的方法，那我必须得先构建探针是吧 2我 ...

原位杂交主要是检测某个基因在体内的表达情况，当然先知道有这个基因存在。至于通用探针，我想是由于基因的保守性决定的吧。要检测哪个基因才去合成哪个基因的探针，合成的方法什么的书上和网上都有。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2012-10-06 18:06:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 so_what 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭