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斑马鱼胚胎整体原位杂交问题求助!
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so_what
无虫
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虫号: 1748820
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专业: 药物毒理
[
求助
]
斑马鱼胚胎整体原位杂交问题求助!
我做的是RNA原位杂交的,用的24hpf的鱼,做了2次,最后显色的时候发现胚胎都碎了,求助各位高人这是由哪些原因引起的,有点纠结啊,谢谢大家指点啊。
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1楼
2012-04-12 16:59:25
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cjn310
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4楼
:
Originally posted by
GOLAN
at 2012-04-15 18:28:52
蛋白酶消化时间短一点,浓度放低点试试
1我想检测斑马鱼的??(原位杂交到底是干什么用的,是用来检测斑马鱼有没有什么基因吗,这里能具体说说吗,那检测出来的话具体应用是什么,应用到其他生物上说明什么呢),用原位杂交的方法,那我必须得先构建探针是吧 2我看好多探针都是通用的,这是什么原理啊,不是每种基因对应的序列不一样吗,那怎么会有什么公共探针和探针库的概念呢(我 3要检测的序列是已知的还是未知的呢,如果是未知的那探针怎么个合成法(没有序列怎么合成探针)
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7楼
2012-10-06 15:21:29
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curie
铁杆木虫
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MM
专业: 数理统计
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励帮助解答,欢迎继续交流。
2012-04-12 19:48:21
你是用什么方法做的RNA原位杂交?这对RNA量要求很高吧。 现在Affymetrix的ViewRNA很方便做原位,对RNA的量要求也很低,但价格稍贵……
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2楼
2012-04-12 17:28:50
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so_what
无虫
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虫号: 1748820
注册: 2012-04-10
专业: 药物毒理
引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
curie
at 2012-04-12 17:28:50:
你是用什么方法做的RNA原位杂交?这对RNA量要求很高吧。 现在Affymetrix的ViewRNA很方便做原位,对RNA的量要求也很低,但价格稍贵……
RNA要求现在不是问题,但发现现在胚胎都碎了,尴尬了
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3楼
2012-04-12 18:06:01
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GOLAN
木虫
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虫号: 782308
注册: 2009-05-29
性别: GG
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
蛋白酶消化时间短一点,浓度放低点试试
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4楼
2012-04-15 18:28:52
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