24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1798  |  回复: 9

kjchao0316

新虫 (初入文坛)

[交流] 纯化后蛋白没有活性 已有4人参与

最近纯化一个蛋白,大小35KD左右,蛋白是包涵体表达,洗涤后经SDS-PAGE验证蛋白大小和纯度都不是问题,但是不论用8M尿素、Tris-NaOH、0.5%SLS溶解后测活性,基本没活性,求教应该怎么处理
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小cool

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
包涵体肯定没有活性的,需要复性

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2014-12-16 18:52:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

成都连接流体

新虫 (正式写手)

稷安生物超哥?
3楼2014-12-25 17:35:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
摸索表达条件,尽量活性表达在上清液。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2014-12-25 22:16:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kjchao0316

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小小cool at 2014-12-16 18:52:31
包涵体肯定没有活性的,需要复性

复兴后也没有活性,变性条件下向让蛋白的作用表位都暴露,但是和目的片段已然没有活性
5楼2014-12-31 13:20:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kjchao0316

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2014-12-25 22:16:44
摸索表达条件,尽量活性表达在上清液。

低温也表达过,始终是包涵体。。。。
6楼2014-12-31 13:21:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kjchao0316

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 成都连接流体 at 2014-12-25 17:35:07
稷安生物超哥?

段?
7楼2014-12-31 13:22:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小cool

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
建议用pcold-sumo试试

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
8楼2014-12-31 20:42:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小cool

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
就是这个质粒,http://www.miaolingbio.com/cn/product/plasmid/485.html

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
9楼2014-12-31 23:56:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dt_lilin

铜虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果包涵体复性也没有活性,那建议你对表达条件进行优化,从上清中提取试试

可以到这个网站上看看——上清蛋白表达服务http://www.detaibio.com/bacteria ... rantee-service.html
10楼2015-01-16 09:30:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 kjchao0316 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 298求调剂 +4 manman511 2026-04-05 4/200 2026-04-08 16:50 by tjzhao
[考研] 一志愿电子科技大学085600材料与化工 329分求调剂 +11 Naiko 2026-04-04 11/550 2026-04-08 14:00 by wutongshun
[考研] 求助071001调剂!!! +6 黄守松 2026-04-05 7/350 2026-04-08 11:54 by 猪会飞
[考研] 机械工程264学硕求调剂 +3 qiushangxian 2026-04-06 3/150 2026-04-08 01:53 by Linzejun
[考研] 作栽330调剂 +3 我要上好学 2026-04-02 4/200 2026-04-07 19:54 by biomichael
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-07 11/550 2026-04-07 15:13 by shdgaomin
[考研] 0703调剂 +16 拾玖壹 2026-04-04 18/900 2026-04-07 12:49 by flydream1314
[考研] 338求调剂 +4 我想上岸ii 2026-04-05 4/200 2026-04-06 21:04 by 木子君1218
[考研] 生物学求调剂 一志愿沪9,326分 +6 刘墨墨 2026-04-06 6/300 2026-04-06 19:36 by lijunpoly
[考研] 生物与医药求调剂 +7 heguanhua 2026-04-05 8/400 2026-04-06 18:41 by macy2011
[考研] 285求调剂 +5 mapmath 2026-04-06 6/300 2026-04-06 17:18 by 蓝云思雨
[考研] 专硕304找调剂,一线城市最好 +3 李lsl李 2026-04-05 3/150 2026-04-06 12:16 by ffffjjjj
[考研] 272分求调剂 +4 wangyile2233 2026-04-02 4/200 2026-04-05 22:21 by 286640313
[考研] 329求调剂 +17 miaodesi 2026-04-02 20/1000 2026-04-05 18:33 by 蓝云思雨
[考研] 材料调剂 +11 吴棂颖! 2026-04-03 11/550 2026-04-04 09:56 by 小小树2024
[考研] 本科985,专业0812分336求调剂 +4 莫莫很行 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:31 by zhq0425
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:06 by arrow8852
[考研] 313求调剂 +3 ~微微凉~ 2026-04-03 3/150 2026-04-03 11:25 by 啵啵啵0119
[考研] 346求调剂 +5 郑诚乐 2026-04-02 5/250 2026-04-02 16:38 by SZW_UJN
[考研] 江苏科技大学招材料研究生 +4 Su032713. 2026-04-01 5/250 2026-04-01 22:03 by cccchenso
信息提示
请填处理意见