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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 纯化的包涵体蛋白透析后怎么没有了？
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linsui1989

新虫 (小有名气)

[求助] 纯化的包涵体蛋白透析后怎么没有了？ 已有1人参与

我纯化了包涵体蛋白后，跑SDS-PAGE看到很纯的目的带，量也挺大的，为了除去尿素，用生理盐水做了透析，透析完后蛋白都沉淀出来了，调了一下PH，沉淀减少了很多，可是跑sds-page胶就啥也没有了，请问是怎么回事？
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1楼 2014-08-13 17:42:06
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elise1987

金虫 (著名写手)
检查一下透析袋漏了没？透析液也浓缩检测一下是否含有蛋白。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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不折腾，不胡闹，珍惜时间和生命
2楼2014-08-14 08:57:06
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xcchh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
linsui1989(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-18 10:04:31
透析袋的范围选择，得考虑蛋白的分子大小啊，别漏掉了
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3楼2014-08-14 16:54:22
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linsui1989

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xcchh at 2014-08-14 16:54:22
透析袋的范围选择，得考虑蛋白的分子大小啊，别漏掉了

如果是漏掉了，那沉淀出来的是什么东西？

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2014-08-17 12:37:19
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linsui1989

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xcchh at 2014-08-14 16:54:22
透析袋的范围选择，得考虑蛋白的分子大小啊，别漏掉了

如果是漏掉了，那沉淀出来的是什么东西？

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2014-08-17 12:39:15
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xcchh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
linsui1989(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-18 10:04:49
引用回帖:
5楼: Originally posted by linsui1989 at 2014-08-17 12:39:15
如果是漏掉了，那沉淀出来的是什么东西？
...

你应该先确定蛋白大小，确定透析袋的规格？
假如你选的透析袋的规格不对导致蛋白漏掉了，那剩下的沉淀可能就是杂质了
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6楼2014-08-18 09:45:11
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linsui1989

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by xcchh at 2014-08-18 09:45:11
你应该先确定蛋白大小，确定透析袋的规格？
假如你选的透析袋的规格不对导致蛋白漏掉了，那剩下的沉淀可能就是杂质了...

我的蛋白是20KD 和40KD，我回去看了一下，透析袋MD34的规格是8000-14000，这样的话，蛋白是不是应该还留在透析袋里面？
我用的是新的透析袋，所以直接煮沸十分钟就用了，有影响吗？
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7楼2014-08-24 08:55:43
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xcchh

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by linsui1989 at 2014-08-24 08:55:43
我的蛋白是20KD 和40KD，我回去看了一下，透析袋MD34的规格是8000-14000，这样的话，蛋白是不是应该还留在透析袋里面？
我用的是新的透析袋，所以直接煮沸十分钟就用了，有影响吗？...

是的，蛋白还留在透析袋里面的
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8楼2014-08-25 08:51:41
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