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linsui1989

新虫 (小有名气)

[求助] 纯化的包涵体蛋白透析后怎么没有了? 已有1人参与

我纯化了包涵体蛋白后,跑SDS-PAGE看到很纯的目的带,量也挺大的,为了除去尿素,用生理盐水做了透析,透析完后蛋白都沉淀出来了,调了一下PH,沉淀减少了很多,可是跑sds-page胶就啥也没有了,请问是怎么回事?
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elise1987

金虫 (著名写手)

检查一下透析袋漏了没?透析液也浓缩检测一下是否含有蛋白。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
不折腾,不胡闹,珍惜时间和生命
2楼2014-08-14 08:57:06
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xcchh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
linsui1989(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-18 10:04:31
透析袋的范围选择,得考虑蛋白的分子大小啊,别漏掉了
3楼2014-08-14 16:54:22
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linsui1989

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xcchh at 2014-08-14 16:54:22
透析袋的范围选择,得考虑蛋白的分子大小啊,别漏掉了

如果是漏掉了,那沉淀出来的是什么东西?

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-08-17 12:37:19
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linsui1989

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xcchh at 2014-08-14 16:54:22
透析袋的范围选择,得考虑蛋白的分子大小啊,别漏掉了

如果是漏掉了,那沉淀出来的是什么东西?

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-08-17 12:39:15
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xcchh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


linsui1989(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-18 10:04:49
引用回帖:
5楼: Originally posted by linsui1989 at 2014-08-17 12:39:15
如果是漏掉了,那沉淀出来的是什么东西?
...

你应该先确定蛋白大小,确定透析袋的规格?
假如你选的透析袋的规格不对导致蛋白漏掉了,那剩下的沉淀可能就是杂质了
6楼2014-08-18 09:45:11
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linsui1989

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by xcchh at 2014-08-18 09:45:11
你应该先确定蛋白大小,确定透析袋的规格?
假如你选的透析袋的规格不对导致蛋白漏掉了,那剩下的沉淀可能就是杂质了...

我的蛋白是20KD 和40KD,我回去看了一下,透析袋MD34的规格是8000-14000,这样的话,蛋白是不是应该还留在透析袋里面?
我用的是新的透析袋,所以直接煮沸十分钟就用了,有影响吗?
7楼2014-08-24 08:55:43
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xcchh

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by linsui1989 at 2014-08-24 08:55:43
我的蛋白是20KD 和40KD,我回去看了一下,透析袋MD34的规格是8000-14000,这样的话,蛋白是不是应该还留在透析袋里面?
我用的是新的透析袋,所以直接煮沸十分钟就用了,有影响吗?...

是的,蛋白还留在透析袋里面的
8楼2014-08-25 08:51:41
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