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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 纯化的抗体为什么要透析，如果不透析，有没有别的方法处理？
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右手画情916

新虫 (初入文坛)

[求助] 纯化的抗体为什么要透析，如果不透析，有没有别的方法处理？ 已有3人参与

纯化的抗体为什么要透析，如果不透析，有没有别的方法处理？

[ Last edited by silicare on 2014-3-8 at 15:35 ]
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1楼 2013-04-30 14:40:59
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hmily4504

金虫 (小有名气)
★
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-05-01 07:34:30
透析是为了去除小分子杂质 使大分子量的蛋白质留在透析袋内 是提高纯度的一种方法
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2楼2013-04-30 14:50:20
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一步一步

木虫 (著名写手)
★ ★
wizardfan: 金币+2, 鼓励发帖交流 2013-05-01 07:34:39
透析是为了交换缓冲体系，纯化后的抗体pH不适合抗体长期保存。如果不想透析，可以过G-25柱，原理一样，还是为了交换缓冲液。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

右手画情916
3楼2013-04-30 15:24:54
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netscaner

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 鼓励发帖交流 2013-05-01 07:34:21
为了去掉小分子特别是缓冲液中的阴阳离子。可以用葡聚糖凝胶凝胶柱等技术，但是成本还是透析的低。
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天道酬勤！
4楼2013-04-30 21:09:41
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右手画情916

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 一步一步 at 2013-04-30 15:24:54
透析是为了交换缓冲体系，纯化后的抗体pH不适合抗体长期保存。如果不想透析，可以过G-25柱，原理一样，还是为了交换缓冲液。

透析的时间可以过长吗？在四度2天，抗体会有问题吗？
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5楼2013-05-01 13:44:00
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yakir

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
右手画情916: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-05-02 15:05:23
wizardfan: 金币+2, thanks for sharing the experience 2013-05-02 17:22:07
看你透析液的体积比了，一般是1：20比较好，透析2-4个小时就可以了，2天的话，抗体稳定就没问题，容易降解的话就悲剧了。G-25还是很快的。。。推荐哦，就是贵点。
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一步一步！
6楼2013-05-02 11:06:40
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心死之人

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

透析可以去除抗体中的小分子杂质， 使大分子量的蛋白质留在透析袋内，这样可以提高纯度。
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7楼2014-03-08 15:32:42
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自来也哈哈

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by yakir at 2013-05-02 11:06:40
看你透析液的体积比了，一般是1：20比较好，透析2-4个小时就可以了，2天的话，抗体稳定就没问题，容易降解的话就悲剧了。G-25还是很快的。。。推荐哦，就是贵点。

我想问一下可不可以用50KD的超滤管进行 超滤的方法进行换液  最后使用PBS保存？
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8楼2015-01-27 13:33:47
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lxgnh166

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

最好用超滤，等体积洗滤，时间短，效率高，你的分子量多大，要选合适的膜包，防止透过推荐选择膜包小于你蛋白分子量的10倍。
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9楼2015-01-30 08:56:14
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洋葱头123

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你还可以根据你蛋白的大小选择合适的超滤管进行超滤，就是比较快。但是我觉得没有透析温和并且蛋白损失多，时间允许的话还是透析比较好。透析就是除去缓冲液中的小分子杂质换缓冲体系……希望对你有帮助，milpore有超滤管比较便宜，可多次使用
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10楼2015-02-03 13:56:30
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