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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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fdjzhang

铜虫 (初入文坛)

[求助] 纯酶不透析直接测酶活有影响吗

过了镍柱之后的纯酶,如果不透析,直接测酶活对酶活会有影响吗,望高手们给建议嘿
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


dhd997(金币+1): 鼓励一下 2011-09-02 12:00:03
是变性纯化的么?如果是的话,透析是复性的过程啊~当然得做这一步
2楼2011-09-02 08:34:35
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


dhd997(金币+1): 鼓励探讨 2011-09-02 11:59:49
其中含有的离子会不会影响酶活呢?
jiayoubashaonian
3楼2011-09-02 11:15:53
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fdjzhang

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gaoyang636 at 2011-09-02 08:34:35:
是变性纯化的么?如果是的话,透析是复性的过程啊~当然得做这一步

不是变性纯化的 是破碎之后 直接上样 么有变性和复性嘿
4楼2011-09-04 13:06:56
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fdjzhang

铜虫 (初入文坛)

★ ★
西瓜(金币+2): 欢迎交流 2011-09-04 18:51:14
引用回帖:
3楼: Originally posted by blackrose8089 at 2011-09-02 11:15:53:
其中含有的离子会不会影响酶活呢?

洗脱液含有高浓度咪唑 估计会有影响 我透析了一次 结果第二天早上 蛋白都沉淀了
5楼2011-09-04 13:08:07
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): 鼓励!很活跃啊! 2011-09-04 18:51:27
引用回帖:
5楼: Originally posted by fdjzhang at 2011-09-04 13:08:07:
洗脱液含有高浓度咪唑 估计会有影响 我透析了一次 结果第二天早上 蛋白都沉淀了

遇到过类似的情况,可能是透析时间过长或蛋白浓度过大!
jiayoubashaonian
6楼2011-09-04 15:17:56
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quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3, MolEPI+1): 受教了。 2011-09-05 07:46:19
首先你要分析一下你测试酶学活性所需要的蛋白质浓度,你纯化后的蛋白质的浓度,酶活测试的条件,相关抑制剂等。
如果你测试条件中所添加的蛋白质浓度相对于你纯化的蛋白质浓度而言,很低很低,需要稀释数万倍,那你几乎也就不需要在脱盐了。
致良知
7楼2011-09-05 00:31:46
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fdjzhang

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by quiller2000 at 2011-09-05 00:31:46:
首先你要分析一下你测试酶学活性所需要的蛋白质浓度,你纯化后的蛋白质的浓度,酶活测试的条件,相关抑制剂等。
如果你测试条件中所添加的蛋白质浓度相对于你纯化的蛋白质浓度而言,很低很低,需要稀释数万倍,那 ...

数万倍么有的嘿 也就几倍
8楼2011-09-05 06:55:32
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fdjzhang

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by blackrose8089 at 2011-09-04 15:17:56:
遇到过类似的情况,可能是透析时间过长或蛋白浓度过大!

透析最短多长时间
9楼2011-09-05 06:56:09
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辉辉集团

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

什么酶啊 不知道 呵呵 就谈了 那么多
10楼2011-09-05 08:28:35
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