24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2965  |  回复: 15

王雨云

金虫 (小有名气)

[交流] 【交流/求助】关于纤维素酶测酶活的问题 已有6人参与

我要测一株真菌的内切葡聚糖酶活力大小,目前遇到的问题是实验组和对照组加DNS煮沸后颜色都很深,对照组是100°煮沸5分钟来灭活后再与实验组一起温育30分钟的方法来测酶活,后来改为:对照组直接加DNS+粗酶液+底物,但这样煮沸后颜色还是很深,看文章有将对照组用NaOH处理后再测酶活,貌似这样处理对照组后颜色就不深了,但不知道是不是由于碱与葡萄糖反应了,加DNS后就不显色了,不一定是强碱使蛋白质变性才导致加DNS后不显色的,不知道有没有人做过这方面的实验,能否解释一下?

[ Last edited by amisking on 2009-12-11 at 22:47 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gj5188

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也遇到过这种情况,关键是你的酶液本身含有一定量的葡萄糖,将酶液透析或过凝胶柱处理
2楼2009-12-03 21:41:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王雨云

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by gj5188 at 2009-12-3 21:41:
我也遇到过这种情况,关键是你的酶液本身含有一定量的葡萄糖,将酶液透析或过凝胶柱处理

我直接将发酵液加DNS后煮沸显色,颜色很深,跟加了底物温育之后的颜色都差不多了,不知道是否说明我的这个菌的酶活不高。反正至少可以说明加底物再温育这个过程酶对底物的作用不大。但又觉得葡萄糖的产生应该就是酶的降解作用吧,还真不知道这个该怎么解释了
3楼2009-12-11 19:51:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

champin110

新虫 (初入文坛)

说明你发酵液当中有一定量的还原糖呀,你发酵培养基中的碳源加的是什么,照你说的那种情况应该是微生物没有怎么利用培养基中的还原糖。
知识...
4楼2009-12-24 14:47:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王雨云

金虫 (小有名气)

碳源应该是羧甲基纤维素钠吧,这也是底物。主要是该真菌产的酶把羧甲基纤维素钠降解为还原糖,而且发酵液中还原糖的量还会影响真菌产酶的能力
5楼2010-01-05 15:59:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smallcat227

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
楼上说的对,透析处理可以,但比较麻烦,可以把粗酶液稀释后再加,这样影响就小多了
6楼2010-01-05 16:19:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王雨云

金虫 (小有名气)

也许吧,谢谢楼上的回答
7楼2010-01-16 10:27:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

85715623

木虫 (正式写手)

发酵培养基成分是一方面因素,可以把对照组加水啊,然后一起反应,煮沸不就解决了吗?
8楼2010-01-16 10:38:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

秀才ecust

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
silicare(金币+3): 谢谢参与 2011-01-22 11:07:49
主要有二种情况:第一,底物可能受到酶的污染,时间长了,没有放入冰箱里保存
第二,是酶液本身含有很高的还原性糖,可以稀释,再测,不然测出来是数据偏小!
9楼2011-01-22 05:09:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aaa6239

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 王雨云 at 2009-12-11 19:51:45:
我直接将发酵液加DNS后煮沸显色,颜色很深,跟加了底物温育之后的颜色都差不多了,不知道是否说明我的这个菌的酶活不高。反正至少可以说明加底物再温育这个过程酶对底物的作用不大。但又觉得葡萄糖的产生应该就 ...

既然你直接将发酵液跟DNS反应颜色都很深,那就说明对照里面的还原糖来自酶液。想办法去除酶液本身还有的还原糖或者稀释酶液的还原糖。
但是,用稀释的办法去消除对照中糖的影响,同样会稀释酶。如果粗酶液中酶活力不高的话,稀释后会测不出酶活。
我自己曾经就对这问题非常头痛,后来在培养基中干脆就不加糖类诱导物。
10楼2012-03-10 20:33:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 王雨云 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 385分 生物学(071000)求调剂 +11 qf626 2026-04-01 11/550 2026-04-05 17:35 by Ecowxq666!
[考研] 277求调剂 +5 瓶子PZ 2026-04-05 5/250 2026-04-05 17:00 by yulian1987
[考研] 数一英一274机械调剂 +5 星陨流霞 2026-04-04 6/300 2026-04-05 11:38 by arrow8852
[考研] 0854求调剂 +4 assdll 2026-04-04 4/200 2026-04-05 09:44 by zhq0425
[考研] 283求调剂 +10 A child 2026-04-04 10/500 2026-04-05 08:22 by qlm5820
[考研] 313求调剂 +3 海日海日 2026-04-04 3/150 2026-04-05 07:48 by 544594351
[考研] 266分,一志愿电气工程,本科材料,求材料专业调剂 +11 哇呼哼呼哼 2026-04-01 12/600 2026-04-04 23:17 by 永字号
[考研] 材料调剂 +15 一样YWY 2026-04-01 15/750 2026-04-04 22:23 by hemengdong
[考研] 求调剂 +4 晟功? 2026-04-03 4/200 2026-04-04 21:58 by hemengdong
[考研] 282电子信息0854专硕调剂 +4 202451007219 2026-04-02 6/300 2026-04-04 21:55 by laoshidan
[考研] 一志愿双非085502,267分,过四级求调剂 +3 再忙也要吃饭啊 2026-04-03 3/150 2026-04-04 05:03 by gswylq
[考研] 调剂0855-288 +5 x熊二a 2026-04-03 5/250 2026-04-04 00:19 by 猪会飞
[考研] 288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工 +39 洛神哥哥 2026-03-31 41/2050 2026-04-03 21:51 by qlm5820
[考研] 085600专硕材料与化工348分求调剂 +10 上学啦! 2026-04-01 11/550 2026-04-03 14:13 by 百灵童888
[考研] 重庆大学材料与化工085600,初试370+,求求调剂建议 +8 shzhou_ 2026-04-01 9/450 2026-04-03 09:31 by 蓝云思雨
[考研] 材料专业求调剂 +10 月月鸟木 2026-04-01 10/500 2026-04-02 12:57 by wxiongid
[考研] 0805求调剂 +8 是水分 2026-03-31 8/400 2026-04-02 10:46 by guanxin1001
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-03-31 11/550 2026-04-01 22:25 by zhouyuwinner
[考研] 0817化工学硕调剂 +11 努力上岸中! 2026-03-31 11/550 2026-04-01 20:30 by 赖春艳
[考研] 265求调剂 +11 yelck 2026-04-01 12/600 2026-04-01 19:12 by 549790059
信息提示
请填处理意见