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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 纤维素酶活性测定，样品含糖量高怎么办？
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蓝风叙

木虫 (著名写手)

[求助] 纤维素酶活性测定，样品含糖量高怎么办？

如题，样品含糖量很高，20-30mg/g，怎么去除糖的影响呢？
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1楼 2011-04-27 10:52:50
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897108861

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

蓝风叙(金币+1): 谢谢回帖交流 2011-05-04 09:43:36
本人 最近在做纤维素酶解 糖对纤维素酶抑制很明显 我也想知道撤
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2楼2011-05-03 22:06:40
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violet.zhou

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 鼓励参与，希望对楼主有所帮助 2011-05-04 17:43:00
蓝风叙(金币+3): 谢谢回帖交流，这样样品空白很大，测定结果误差比较大 2011-05-05 09:42:46
直接测出来还原糖的总量减去样品的含糖量
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3楼2011-05-04 13:24:34
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protein_

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

蓝风叙(金币+2): 谢谢，有这样可以使糖沉淀的有机溶剂吗？ 2011-05-05 09:44:03
蓝风叙(金币+4): ... 2011-05-09 16:49:18
用一些有机溶剂把糖沉下来可以吗，但不知道应不影响你的样品。
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4楼2011-05-04 22:05:28
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violet.zhou

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

蓝风叙(金币+5): 谢谢，测酶活性是通过测还原糖来实现的啊，所以空白还会出现很大的吸光度 2011-05-06 11:41:13
引用回帖:
Originally posted by violet.zhou at 2011-05-04 13:24:34:
直接测出来还原糖的总量减去样品的含糖量

我想楼主你没明白我的意思，你可以上HPLC之类的直接测出你的含糖量，再按照测酶活的方法测还原糖，然后相减。
不存在LZ你说的样品空白很大的问题。
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5楼2011-05-05 09:49:20
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protein_

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

蓝风叙(金币+5): 2011-05-06 11:41:42
引用回帖:
Originally posted by protein_ at 2011-05-04 22:05:28:
用一些有机溶剂把糖沉下来可以吗，但不知道应不影响你的样品。

我们实验室除糖都是用乙醇和丙酮，但是不知道你的样品影响大不大。
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6楼2011-05-05 13:06:25
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17时31分

铜虫 (初入文坛)
背景含糖量高对测定结果影响很大，我估计你是想测发酵液中的纤维素酶酶活，纤维素酶是大分子蛋白质，可以通过分子筛分离一下，但是这样就必须浓缩样品，用乙醇或者硫酸铵沉淀试试，看看哪个回收率比较高。还有也可以将液体稀释一下，延长反应时间至1h试试。
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7楼2011-11-29 16:32:28
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majiangshan

银虫 (小有名气)
测出来的含糖量减去之前的含糖量就OK
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让梦想照进现实
8楼2011-11-29 17:44:04
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