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jukongka

铁杆木虫 (著名写手)

年度最忠心木虫

[交流] 【求助/交流】有从落叶筛选产纤维素酶细菌的虫友吗已有7人参与

有从落叶筛选产纤维素酶细菌的虫友吗?有个问题请教啊。
筛选了好一段时间了,总是筛不到细菌,真菌倒是有一些,怎么回事呢?
我的筛选培养基配方如下,请有经验的虫友帮助啊,谢谢!
CMC 2g,MgSO4 0.5g, kH2PO4 1g, NaCl 0.5g, (NH4)2SO4 4g, Agar 18g,水1000mL
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秀才ecust

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
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silicare(金币+2): 谢谢参与 2011-01-22 11:08:23
少加了微量元素,pH调到7
2楼2011-01-22 04:51:09
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toughman

新虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
没氮源啊兄弟。。
加蛋白胨
3楼2011-01-22 12:07:00
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献


rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-27 08:29:13
引用回帖:
Originally posted by toughman at 2011-01-22 12:07:00:
没氮源啊兄弟。。
加蛋白胨

,咋会没有氮源呢, 硫酸铵就是氮源啊。 少一些微量元素和维生素罢了。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
4楼2011-01-22 12:36:45
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★
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rainwander(金币+2): 鼓励分享自己的经验,并且很积极的参与交流~~~ 2011-01-23 13:39:29
加一点胰蛋白胨,细菌消化有机氮源比消化无机氮源快,而且胰蛋白胨里营养丰富,细菌的代谢比真菌复杂,生长会好一些。把硫酸铵换成硝酸钠,这是我筛选淀粉酶产生细菌的经验,当时比较过生长情况,但没思考过原因。这样细菌的数量和菌落大小会增加。至于pH值,磷酸氢二钾加进去之后应该在5-6,而你的琼脂粉用量只有1.8%,能凝固,就表明你的培养基pH值不小于5,所以我认为主要原因不是pH值,但调节到7会好一些。我们实验室的琼脂粉太少了,培养基太酸了就不凝固,你们的琼脂粉不会比我们的好太多吧?
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2011-01-22 18:10:21
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toughman

新虫 (著名写手)

★ ★
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rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-27 08:29:04
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-01-22 12:36:45:



,咋会没有氮源呢, 硫酸铵就是氮源啊。 少一些微量元素和维生素罢了。

你不是想分细菌吗?一般都是异养的,所以要有机氮源。大兄弟
6楼2011-01-23 09:14:14
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lixiaoyi1981

荣誉版主 (正式写手)

★ ★ ★
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rainwander(金币+2): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-27 08:28:56
1、加一点有机氮源,0.05%就可以,满足细菌生长,还可以加一点葡萄糖,因为纤维素酶是诱导酶,需要先让细菌生长起来;
2、如果只想筛到细菌,加少量制霉菌素一类的真菌抗生素抑制真菌生长;
3、最好先用增菌培养基进行增菌,这样筛选时可以增大几率
4、如果菌株有特殊需求,可以在温度上做做文章(我筛高温菌时发现效果不错)
7楼2011-01-25 15:16:46
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苜奚流沙

新虫 (初入文坛)


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我正在做从淤泥中筛选纤维素分解菌的课题,不知道培养基该怎么配制
8楼2012-07-31 16:22:34
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mashuge

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by toughman at 2011-01-22 12:07:00
没氮源啊兄弟。。
加蛋白胨

不是有硫酸铵哪吗 可以做无机氮啊
珍惜自己现在拥有的,别等失去才追悔莫及,人只有经历了才会懂才会成熟,加油,未来的日子好好过!
9楼2013-05-15 21:26:51
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