应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【交流/求助】关于纤维素酶测酶活的问题
161/2返回列表12下一页
查看: 3773  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

王雨云

金虫 (小有名气)

[交流] 【交流/求助】关于纤维素酶测酶活的问题 已有6人参与

我要测一株真菌的内切葡聚糖酶活力大小，目前遇到的问题是实验组和对照组加DNS煮沸后颜色都很深，对照组是100°煮沸5分钟来灭活后再与实验组一起温育30分钟的方法来测酶活，后来改为：对照组直接加DNS+粗酶液+底物，但这样煮沸后颜色还是很深，看文章有将对照组用NaOH处理后再测酶活，貌似这样处理对照组后颜色就不深了，但不知道是不是由于碱与葡萄糖反应了，加DNS后就不显色了，不一定是强碱使蛋白质变性才导致加DNS后不显色的，不知道有没有人做过这方面的实验，能否解释一下？

[ Last edited by amisking on 2009-12-11 at 22:47 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2009-11-27 16:21:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gj5188

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也遇到过这种情况，关键是你的酶液本身含有一定量的葡萄糖，将酶液透析或过凝胶柱处理
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-12-03 21:41:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王雨云

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gj5188 at 2009-12-3 21:41:
我也遇到过这种情况，关键是你的酶液本身含有一定量的葡萄糖，将酶液透析或过凝胶柱处理

我直接将发酵液加DNS后煮沸显色，颜色很深，跟加了底物温育之后的颜色都差不多了，不知道是否说明我的这个菌的酶活不高。反正至少可以说明加底物再温育这个过程酶对底物的作用不大。但又觉得葡萄糖的产生应该就是酶的降解作用吧，还真不知道这个该怎么解释了
赞一下 回复此楼
3楼2009-12-11 19:51:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

champin110

新虫 (初入文坛)
说明你发酵液当中有一定量的还原糖呀，你发酵培养基中的碳源加的是什么，照你说的那种情况应该是微生物没有怎么利用培养基中的还原糖。
赞一下 回复此楼
知识...
4楼2009-12-24 14:47:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王雨云

金虫 (小有名气)
碳源应该是羧甲基纤维素钠吧，这也是底物。主要是该真菌产的酶把羧甲基纤维素钠降解为还原糖，而且发酵液中还原糖的量还会影响真菌产酶的能力
赞一下 回复此楼
5楼2010-01-05 15:59:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smallcat227

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
楼上说的对，透析处理可以，但比较麻烦，可以把粗酶液稀释后再加，这样影响就小多了
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-01-05 16:19:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王雨云

金虫 (小有名气)
也许吧，谢谢楼上的回答
赞一下 回复此楼
7楼2010-01-16 10:27:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

85715623

木虫 (正式写手)
发酵培养基成分是一方面因素，可以把对照组加水啊，然后一起反应，煮沸不就解决了吗？
赞一下 回复此楼
8楼2010-01-16 10:38:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

秀才ecust

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+3): 谢谢参与 2011-01-22 11:07:49
主要有二种情况：第一，底物可能受到酶的污染，时间长了，没有放入冰箱里保存
第二，是酶液本身含有很高的还原性糖，可以稀释，再测，不然测出来是数据偏小！
赞一下(2人) 回复此楼
9楼2011-01-22 05:09:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aaa6239

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 王雨云 at 2009-12-11 19:51:45:
我直接将发酵液加DNS后煮沸显色，颜色很深，跟加了底物温育之后的颜色都差不多了，不知道是否说明我的这个菌的酶活不高。反正至少可以说明加底物再温育这个过程酶对底物的作用不大。但又觉得葡萄糖的产生应该就 ...

既然你直接将发酵液跟DNS反应颜色都很深，那就说明对照里面的还原糖来自酶液。想办法去除酶液本身还有的还原糖或者稀释酶液的还原糖。
但是，用稀释的办法去消除对照中糖的影响，同样会稀释酶。如果粗酶液中酶活力不高的话，稀释后会测不出酶活。
我自己曾经就对这问题非常头痛，后来在培养基中干脆就不加糖类诱导物。
赞一下 回复此楼
10楼2012-03-10 20:33:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 王雨云 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？ +8 wangyl_123 2026-10-10 12/600 2026-10-13 20:40 by Merryya
[硕博家园] 极限拉扯，如何抉择 +9 Isak0320 2026-10-12 13/650 2026-10-13 11:57 by Isak0320
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么？ +4 好运来～9527 2026-10-10 7/350 2026-10-13 08:41 by xli1984
[基金申请] 入职后第一次管课题组的专利缴费，对账才发现官费比别人多掏了一倍 +6 13108017953 2026-10-08 6/300 2026-10-12 20:07 by w3w3y3
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷！
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
[有机交流] 各位大佬，路线设计求助 +6 zapen 2026-10-08 8/400 2026-10-10 15:59 by zapen
[有机交流] 我应该选哪条合成路线让实验成功率高一些？ +5 jing816y 2026-10-08 9/450 2026-10-10 09:05 by zapen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭