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王雨云

金虫 (小有名气)

[交流] 【交流/求助】关于纤维素酶测酶活的问题已有6人参与

我要测一株真菌的内切葡聚糖酶活力大小,目前遇到的问题是实验组和对照组加DNS煮沸后颜色都很深,对照组是100°煮沸5分钟来灭活后再与实验组一起温育30分钟的方法来测酶活,后来改为:对照组直接加DNS+粗酶液+底物,但这样煮沸后颜色还是很深,看文章有将对照组用NaOH处理后再测酶活,貌似这样处理对照组后颜色就不深了,但不知道是不是由于碱与葡萄糖反应了,加DNS后就不显色了,不一定是强碱使蛋白质变性才导致加DNS后不显色的,不知道有没有人做过这方面的实验,能否解释一下?

[ Last edited by amisking on 2009-12-11 at 22:47 ]
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秀才ecust

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
silicare(金币+3): 谢谢参与 2011-01-22 11:07:49
主要有二种情况:第一,底物可能受到酶的污染,时间长了,没有放入冰箱里保存
第二,是酶液本身含有很高的还原性糖,可以稀释,再测,不然测出来是数据偏小!
9楼2011-01-22 05:09:44
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