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七小艾

新虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE总蛋白上样量 已有6人参与

SDS-PAGE总蛋白,上样量多少合适呀?10孔的伯乐的蛋白胶,上样体积最大可以达到多少?
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lpzl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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七小艾: 金币+2, 有帮助 2014-12-13 19:49:00
理论上可以上样最大38ul 吧。。。一般上样10-15ul 比较好。。我就是这么做的
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2014-12-09 09:52:55
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普通回帖

wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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七小艾: 金币+2, 有帮助 2014-12-13 19:49:13
上样体积的话,5-20μl都可以,只要你的样品不漂出来污染别的泳道就可以!不过你上多大的体积,其实还是要看你上样的蛋白量,不要太多,那样会把泳道撑开,太少反正看不清蛋白!考染可以多上些蛋白!
I am not a hero , but I served with heroes!
3楼2014-12-09 20:12:10
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

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七小艾: 金币+2, 有帮助 2014-12-13 19:49:29
多大尺寸的梳子齿决定可以上样多大的样品体积。另外,你可以自己做胶或别人做胶跑之前拔掉梳子之后,加水看看能加多少。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2014-12-10 01:22:05
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enzyming

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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七小艾: 金币+2 2014-12-13 19:49:39
你可以加到100微升!!!不用担心,多加几次。

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5楼2014-12-10 02:53:37
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
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七小艾: 金币+2 2014-12-13 19:49:47
40 μl,再多就容易溢到旁边的孔。
6楼2014-12-10 08:36:36
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zhang001zh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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看梳孔大小吧  我一般用2-20ul 不用太多 个人喜欢上10ug蛋白

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7楼2014-12-10 16:41:31
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陶然悦

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by enzyming at 2014-12-10 02:53:37
你可以加到100微升!!!不用担心,多加几次。

怎么多加几次?

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2014-12-12 18:07:55
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enzyming

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 陶然悦 at 2014-12-12 18:07:55
怎么多加几次?
...

跑一会停一下再加。好好掌握火候啊

[ 发自小木虫客户端 ]
9楼2014-12-13 05:35:16
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七小艾

新虫 (小有名气)

谢谢大家了,尝试了一下,胶做的好的话大概能上20ul~~
10楼2014-12-13 19:48:41
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