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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » SDS-PAGE总蛋白上样量
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七小艾

新虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE总蛋白上样量 已有6人参与

SDS-PAGE总蛋白，上样量多少合适呀？10孔的伯乐的蛋白胶，上样体积最大可以达到多少？
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1楼 2014-12-09 08:47:03
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lpzl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
七小艾: 金币+2, ★有帮助 2014-12-13 19:49:00
理论上可以上样最大38ul 吧。。。一般上样10-15ul 比较好。。我就是这么做的
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Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2014-12-09 09:52:55
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普通回帖

wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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七小艾: 金币+2, ★有帮助 2014-12-13 19:49:13
上样体积的话，5-20μl都可以，只要你的样品不漂出来污染别的泳道就可以！不过你上多大的体积，其实还是要看你上样的蛋白量，不要太多，那样会把泳道撑开，太少反正看不清蛋白！考染可以多上些蛋白！
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I am not a hero , but I served with heroes！
3楼2014-12-09 20:12:10
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★
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七小艾: 金币+2, ★有帮助 2014-12-13 19:49:29
多大尺寸的梳子齿决定可以上样多大的样品体积。另外，你可以自己做胶或别人做胶跑之前拔掉梳子之后，加水看看能加多少。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2014-12-10 01:22:05
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enzyming

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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七小艾: 金币+2 2014-12-13 19:49:39
你可以加到100微升！！！不用担心，多加几次。

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5楼2014-12-10 02:53:37
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
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七小艾: 金币+2 2014-12-13 19:49:47
40 μl，再多就容易溢到旁边的孔。
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6楼2014-12-10 08:36:36
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zhang001zh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看梳孔大小吧  我一般用2-20ul 不用太多 个人喜欢上10ug蛋白

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7楼2014-12-10 16:41:31
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陶然悦

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by enzyming at 2014-12-10 02:53:37
你可以加到100微升！！！不用担心，多加几次。

怎么多加几次？

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8楼2014-12-12 18:07:55
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enzyming

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 陶然悦 at 2014-12-12 18:07:55
怎么多加几次？
...

跑一会停一下再加。好好掌握火候啊

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9楼2014-12-13 05:35:16
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七小艾

新虫 (小有名气)
谢谢大家了，尝试了一下，胶做的好的话大概能上20ul~~
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10楼2014-12-13 19:48:41
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