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wwb95599

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助SDS-PAGE分析蛋白表达量(百分比含量) 已有2人参与

实验室构建了一个表达载体,现在已经诱导表达出来蛋白,但具体表达量占总蛋白的百分比含量是多少,一直困扰着我。求助有这方面分析经验的虫子帮我分析下,感激不尽!

胶附图如下:
1泳道为M,2为诱前,3-10为诱后。目的蛋白在最下面的一条带
求助SDS-PAGE分析蛋白表达量(百分比含量)
1.jpg
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只要路是对的,就不怕路远.
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-01-09 11:24:10
灰度扫描,可以粗略估计
2楼2014-01-09 10:36:52
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wwb95599

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-01-09 10:36:52
灰度扫描,可以粗略估计

可是我分析出来,前后相差太大,不知道怎么相信……
只要路是对的,就不怕路远.
3楼2014-01-09 11:28:42
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-01-09 17:13:50
你可以用bandscan或者quantity one软件,就能扫描出来,其实也只是得到一个大概的比例!
I am not a hero , but I served with heroes!
4楼2014-01-09 13:16:45
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wwb95599

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wlt728 at 2014-01-09 13:16:45
你可以用bandscan或者quantity one软件,就能扫描出来,其实也只是得到一个大概的比例!

两款软件都试了,bandscan 分析表达量60%多,quantity one分析低的只有30%不到,这差异太大了,不知道相信哪款啊啊啊
只要路是对的,就不怕路远.
5楼2014-01-09 15:17:46
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

因为是根据灰度扫描出来的,所以会有误差!
I am not a hero , but I served with heroes!
6楼2014-01-09 16:24:55
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wwb95599

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by wlt728 at 2014-01-09 16:24:55
因为是根据灰度扫描出来的,所以会有误差!

嗯,而且误差比较大,之所以发贴,就是想通过广大虫友,一起分析,得出各自的结果,然后我再取一个平均值,这样相对来说应该是靠谱些!
只要路是对的,就不怕路远.
7楼2014-01-10 10:54:02
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