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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 可否用相对定量检测不同基因的表达丰富比例变化？
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andywang6137

木虫 (著名写手)

[求助] 可否用相对定量检测不同基因的表达丰富比例变化？

比如有A、B、C三个基因，处理前和处理后相对定量看他们的表达差异之外，还想看他们的丰度变化情况。假设A基因（相对内参），初始值为1，处理后表达为8倍，为8；B基因，初始值为10，处理后变成4倍,为40；C基因初始值为100，处理后升高2倍，为200。这样处理前后，表达都发生了变化。虽然C基因表达倍数上调最小，但其所占三个基因之比例[C/(A+B+C)]仍然最高。相对定量能否完成？
    我看了几篇文献都是用绝对定量，一方面绝对定量要用探针，比相对定量染色法要贵很多，另外一个，还需要克隆到质粒里边，测质粒拷贝数，做标准曲线。这方面我没做过。之前只做过相对定量。
    我不需要知道三个基因的具体拷贝数，然后计算所占比例；知道他们相对内参基因的比值，所占比例不是一样可以获得吗？疑惑，不明白，请指教。谢谢！
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1楼 2014-12-08 15:08:00
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