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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 2个不同的荧光染料探针的针对同一个可检测出的基因，荧光增量会不会有交叉
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a3200649

铜虫 (正式写手)

[求助] 2个不同的荧光染料探针的针对同一个可检测出的基因，荧光增量会不会有交叉 已有1人参与

加入针对一个目的基因设计了2对不同的引物（都能扩增目的基因），2个不同的探针（探针上的荧光染料不一样，一个是FAM，一个是VIC),然后对模板DNA进行5个浓度稀释，进行双重荧光定量PCR。请问：假如5个浓度梯度的模板都能被检测出，那么会是有10条扩增曲线吗（FAM修饰的 探针检测5条，VIC修饰的探针检测5条）还是只有5条啊？  
ps：就是说2个不同的荧光染料探针的针对同一个可检测出的基因，荧光增量会不会有交叉（重叠）
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希望大家多多交流
1楼 2014-03-25 17:08:20
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a3200649

铜虫 (正式写手)
没人知道吗？
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2楼2014-03-29 17:17:15
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gyesang

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【答案】应助回帖

★ ★
a3200649(myprayer代发): 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-03-30 16:50:42
5个浓度梯度，每个梯度检测两个基因，应有10条扩增曲线，荧光增量不会有交叉，因为检测波长是不一样的
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2014-03-30 12:07:37
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a3200649

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gyesang at 2014-03-30 12:07:37
5个浓度梯度，每个梯度检测两个基因，应有10条扩增曲线，荧光增量不会有交叉，因为检测波长是不一样的

不是2个基因，是同一个基因设计了2个不同荧光修饰的探针，那荧光增量不会有交叉？
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4楼2014-03-30 19:52:39
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a3200649

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gyesang at 2014-03-30 12:07:37
5个浓度梯度，每个梯度检测两个基因，应有10条扩增曲线，荧光增量不会有交叉，因为检测波长是不一样的

额，说错了，是同一物种的2个基因设计了2个不同荧光修饰的探针，那荧光增量不会有交叉？
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5楼2014-03-30 19:58:25
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gyesang

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引用回帖:
4楼: Originally posted by a3200649 at 2014-03-30 19:52:39
不是2个基因，是同一个基因设计了2个不同荧光修饰的探针，那荧光增量不会有交叉？...

不会，因为荧光的波长不同，会分别做检测
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
6楼2014-03-31 01:40:44
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