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a3200649

铜虫 (正式写手)

[求助] 2个不同的荧光染料探针的针对同一个可检测出的基因,荧光增量会不会有交叉 已有1人参与

加入针对一个目的基因设计了2对不同的引物(都能扩增目的基因),2个不同的探针(探针上的荧光染料不一样,一个是FAM,一个是VIC),然后对模板DNA进行5个浓度稀释,进行双重荧光定量PCR。请问:假如5个浓度梯度的模板都能被检测出,那么会是有10条扩增曲线吗(FAM修饰的 探针检测5条,VIC修饰的探针检测5条)还是只有5条啊?  
ps:就是说2个不同的荧光染料探针的针对同一个可检测出的基因,荧光增量会不会有交叉(重叠)
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gyesang

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【答案】应助回帖

★ ★
a3200649(myprayer代发): 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-03-30 16:50:42
5个浓度梯度,每个梯度检测两个基因,应有10条扩增曲线,荧光增量不会有交叉,因为检测波长是不一样的
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2014-03-30 12:07:37
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a3200649

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gyesang at 2014-03-30 12:07:37
5个浓度梯度,每个梯度检测两个基因,应有10条扩增曲线,荧光增量不会有交叉,因为检测波长是不一样的

不是2个基因,是同一个基因设计了2个不同荧光修饰的探针,那荧光增量不会有交叉?
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4楼2014-03-30 19:52:39
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a3200649

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gyesang at 2014-03-30 12:07:37
5个浓度梯度,每个梯度检测两个基因,应有10条扩增曲线,荧光增量不会有交叉,因为检测波长是不一样的

额,说错了,是同一物种的2个基因设计了2个不同荧光修饰的探针,那荧光增量不会有交叉?
希望大家多多交流
5楼2014-03-30 19:58:25
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gyesang

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引用回帖:
4楼: Originally posted by a3200649 at 2014-03-30 19:52:39
不是2个基因,是同一个基因设计了2个不同荧光修饰的探针,那荧光增量不会有交叉?...

不会,因为荧光的波长不同,会分别做检测
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
6楼2014-03-31 01:40:44
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