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caihang

铜虫 (小有名气)

[求助] 蛋白透析出现问题 已有3人参与

我的目的蛋白是包涵体,过柱后加入PEG4000,还原性和氧化性谷胱甘肽,在PH为7.4的TE Buffer(成分为100mMTris-HCl,10mMEDTA) 中透析,出现大量沉淀,跑蛋白胶后几乎看不到带,求支招。
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myheat

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by caihang at 2014-11-16 12:56:05
依然出现沉淀,请给一个buffer配方。...

有个refolding的数据库。对照你蛋白的性质,自己筛选配方。

[ 发自小木虫客户端 ]
9楼2014-11-16 16:15:58
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winterb

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
caihang(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-15 14:47:08
你的目的蛋白没有复性.必须先复性,再透析.
2楼2014-11-15 01:32:13
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caihang

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by winterb at 2014-11-15 01:32:13
你的目的蛋白没有复性.必须先复性,再透析.

透析的过程就是复性。
3楼2014-11-15 16:50:59
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winterb

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


caihang: 金币+1 2014-11-15 21:32:18
透析的过程是脱盐.不是复性.
4楼2014-11-15 20:33:16
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