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spinel2007

新虫 (初入文坛)

[求助] 丝素溶液透析问题

各位大侠:最近本人在做丝素蛋白溶液过程中,脱胶、溶丝都很顺利,就是在透析过程中出现问题:把LiBr溶解好的溶液注入3500KD的透析袋,去离子水透析大约2小时,澄清的淡黄色液体变成乳白色的半凝胶状态。并且屡做屡败,以前从没出现这种情况,望各位高人指教!!
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白开水女孩

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-07-05 14:08:01
我们是用氯化钙,水,乙醇溶的,然后透析,暂没有出现你说的那种问题
没有最好,自由更好
7楼2012-07-05 13:41:43
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普通回帖

pipibaby

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
mwyuer: 金币+2, 感谢回帖交流 2012-06-16 08:30:59
蛋白质变性了
蛋白质不稳定,很容易变性的
也可能和原料有关系,再就是可能污染了,
还有可能就是分子量过大

脱胶和溶胶的时候,温度越高,越容易打断分子链,分子量就越小,蛋白子就越稳定,分子量过大,容易不稳定
你可以试着升高脱胶和溶胶时候的问题

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2012-06-16 00:45:01
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晚香玉

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
markar: 金币+1, 感谢回帖交流,欢迎常来生物材料版! 2012-06-16 11:38:01
现在温度已经很高了,放4度冰箱透吧。一个小时就得换水!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2012-06-16 11:35:24
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spinel2007

新虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by pipibaby at 2012-06-16 00:45:01
蛋白质变性了
蛋白质不稳定,很容易变性的
也可能和原料有关系,再就是可能污染了,
还有可能就是分子量过大

脱胶和溶胶的时候,温度越高,越容易打断分子链,分子量就越小,蛋白子就越稳定,分子量过大,容易 ...

谢谢
4楼2012-06-16 12:42:10
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spinel2007

新虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 晚香玉 at 2012-06-16 11:35:24
现在温度已经很高了,放4度冰箱透吧。一个小时就得换水!

谢谢,准备试试.
5楼2012-06-16 12:42:44
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lvqlvq

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-06-18 16:03:00
你这是溴化锂的浓度不够!!!!丝蛋白晶体没有完全打散。溴化锂溶液配制时是将一定量的溴化锂配成多少体积的溶液,而不是加多少体积的水,因为溴化锂溶液体积增加很多。增加溴化锂浓度就好了。
6楼2012-06-18 15:20:41
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S100161711

金虫 (小有名气)


mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-07-24 19:56:39
溶解的溴化锂一定要是饱和溶液,逐步加入到胶丝中去,不要一次性加入,加入之后要不断搅拌,为了更快的溶解
8楼2012-07-24 09:14:15
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lyy19860211

新虫 (初入文坛)

★ ★
mwyuer: 金币+2, 感谢新虫回帖交流 2012-08-09 09:49:21
原因可能有三点,一是溴化锂浓度没有达到过饱和,二是透析环境温度过高,三是透析前的溶液没有经过离心取上层清液的步骤。如此造成蛋白质析出或变性。
9楼2012-08-09 09:15:49
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oqoqxxx

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2012-08-13 12:48:53
我也遇到过类似的情况哦,透析完之后就完全是固态了,乳白色橡胶一样的固态~ 我觉得是杂质过多了,浓度也过大,有做过浓度低,杂质少的就未有出现这样情况~
透析一般都是要4度进行,这个温度利于蛋白质复性。
10楼2012-08-13 09:27:35
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