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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » his标签蛋白怎么除咪唑、脱盐？
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appletree-

新虫 (小有名气)

[求助] his标签蛋白怎么除咪唑、脱盐？ 已有6人参与

最近纯化了his标签的蛋 白，为避免对后续实验造成干扰，决定对其进行脱盐及除掉咪唑。我看GE的PD-10脱盐柱可以，但是价格好高，请问还有哪些方法？如果用GE的PD-10，怎么配置相应的缓冲液？
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1楼 2014-04-09 20:39:46
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
貌似透析带也可以去盐哦

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2楼2014-04-09 21:41:51
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lpzl

木虫 (正式写手)
同求同求。。。
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Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
3楼2014-04-09 23:07:14
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robinletter

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-09 21:41:51
貌似透析带也可以去盐哦

对，用透析！Sigma有多种截留分子量的透析管。
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4楼2014-04-09 23:45:48
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wangyue115

木虫 (正式写手)

冰山火种

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
根据你所需要蛋白质的分子量，选择合适的透析袋。为保证蛋白质活性，可以不断的减少透析袋外溶液的离子强度，使透析缓慢完成。以免蛋白沉淀。
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5楼2014-04-10 06:21:12
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appletree-

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wangyue115 at 2014-04-10 06:21:12
根据你所需要蛋白质的分子量，选择合适的透析袋。为保证蛋白质活性，可以不断的减少透析袋外溶液的离子强度，使透析缓慢完成。以免蛋白沉淀。

我觉得透析很容易使蛋白失去活性啊，并且我没有相关的方法来检验其是否失活。
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6楼2014-04-10 08:49:57
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appletree-

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-09 21:41:51
貌似透析带也可以去盐哦

7楼2014-04-10 08:50:45
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
别说GE的了，就是国产的都不便宜。
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8楼2014-04-10 12:02:13
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159236478

至尊木虫 (知名作家)

游来游去之一级游神

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
采用Millipore的超滤管，根据管中膜的截留量，通过离心，进行脱盐。根绝截留量不同，还可分离不同分子量的蛋白，不存在透析变性等问题。
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云山苍苍，江水泱泱，先生之风，山高水长
9楼2014-04-11 07:03:20
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xuyisit

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用超滤离心管来快速脱盐。

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10楼2014-04-11 07:33:25
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