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怎么优化PCR体系 已有2人参与
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目的片段：1200bp 反应体系：cDNA:1ug 引物浓度：250nmol/l 氯化镁：1.5mmol/l Taq酶：0.5U dNTP:200umol/l 循环体系：95℃，5min; 95℃,30s; 44℃~52℃:30s; 72℃:1min30s 引物给出的Tm值最小为49℃，我58℃、60℃都跑过，但是结果都是只有引物二聚体。 引物为师兄帮忙设计，老板说没问题，上下游引物中都含有TTAATTAA酶切位点。 请教各位高手，体系还需要怎么优化？ |
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刘芬玲
金虫 (初入文坛)
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