24小时热门版块排行榜    

查看: 2711  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

95846713

新虫 (初入文坛)

[求助] 带有酶切位点胶回收产物可以与表达载体pet28a直接连接吗? 已有5人参与

引物设计了酶切位点EcorI和BamH I,本想连接pMD18-T在双酶切,但导师告诉我可以用回收产物直接连接pet28a,pet28a我已经用EcorI和BamH I双酶切了露出了粘性末端,我不知道胶回收产物是否也用EcorI和BamH I双酶切露出粘性末端后再与双酶切后的pet28a连接?还是胶回收产物不用双酶切直接与双酶切后的pet28a连接呢? 求解答,既然可以这样连接,那连接pMD-18T的目的是什么呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lpzl

木虫 (正式写手)


kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-11-07 11:39:44
引用回帖:
7楼: Originally posted by hajierlove at 2014-11-05 11:34:09
pcr产物还要双酶切吗...

那是肯定的,PCR产物和载体都用两种相同的酶切,再连接。。。。
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
8楼2014-11-05 15:20:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lpzl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
95846713(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-29 08:49:46
直接连吧。。。PCR产物双酶切后,与同样酶切后的pET28a载体直接连接吧,我一直都是这么干的。。。
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2014-10-29 08:27:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

95846713

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lpzl at 2014-10-29 08:27:47
直接连吧。。。PCR产物双酶切后,与同样酶切后的pET28a载体直接连接吧,我一直都是这么干的。。。

谢谢
3楼2014-10-29 15:43:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hjyxm

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
95846713(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-05 14:19:46
pMD-18T是克隆载体,可以让你的目的片段复制得更多,从而更容易与表达载体相连;理论上来说,目的片段的胶回收产物可以和表达载体直接连接。
好好工作!
4楼2014-10-29 16:01:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 什么时候开奖? +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +5 炎黄贵胄 2026-08-22 6/300 2026-08-24 06:34 by sincosx
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +11 kulium 2026-08-21 14/700 2026-08-24 02:12 by 流流伤
[基金申请] 让我中一个面上吧! +12 大萍1987 2026-08-20 15/750 2026-08-23 20:44 by 大萍1987
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见