24小时热门版块排行榜    

查看: 2798  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

95846713

新虫 (初入文坛)

[求助] 带有酶切位点胶回收产物可以与表达载体pet28a直接连接吗? 已有5人参与

引物设计了酶切位点EcorI和BamH I,本想连接pMD18-T在双酶切,但导师告诉我可以用回收产物直接连接pet28a,pet28a我已经用EcorI和BamH I双酶切了露出了粘性末端,我不知道胶回收产物是否也用EcorI和BamH I双酶切露出粘性末端后再与双酶切后的pet28a连接?还是胶回收产物不用双酶切直接与双酶切后的pet28a连接呢? 求解答,既然可以这样连接,那连接pMD-18T的目的是什么呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

95846713

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lpzl at 2014-10-29 08:27:47
直接连吧。。。PCR产物双酶切后,与同样酶切后的pET28a载体直接连接吧,我一直都是这么干的。。。

谢谢
3楼2014-10-29 15:43:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lpzl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
95846713(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-29 08:49:46
直接连吧。。。PCR产物双酶切后,与同样酶切后的pET28a载体直接连接吧,我一直都是这么干的。。。
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2014-10-29 08:27:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hjyxm

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
95846713(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-05 14:19:46
pMD-18T是克隆载体,可以让你的目的片段复制得更多,从而更容易与表达载体相连;理论上来说,目的片段的胶回收产物可以和表达载体直接连接。
好好工作!
4楼2014-10-29 16:01:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happydove

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
95846713(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-05 14:19:57
目的片段胶回收后 再双酶切 然后再回收  最后和酶切好的载体连接
5楼2014-10-29 17:06:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 7/350 2026-09-16 03:26 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-16 02:38 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 申博发邮件 +4 Lmengk 2026-09-15 4/200 2026-09-16 00:05 by 木心想继续深造
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 20:47 by zNcEhTcH7ihq
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:50 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:35 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-15 18:59 by CgyNCDVNhGVg
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 17:35 by CgyNCDVNhGVg
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:50 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +7 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:23 by CgyNCDVNhGVg
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-15 14:58 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-15 14:25 by VMDqgnlKimtZ
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-15 14:22 by VMDqgnlKimtZ
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:26 by C79jjtjAKjEn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:46 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-14 23:24 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:25 by vZfe6xYu34yj
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
信息提示
请填处理意见