24小时热门版块排行榜    

查看: 2373  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

95846713

新虫 (初入文坛)

[求助] 带有酶切位点胶回收产物可以与表达载体pet28a直接连接吗? 已有5人参与

引物设计了酶切位点EcorI和BamH I,本想连接pMD18-T在双酶切,但导师告诉我可以用回收产物直接连接pet28a,pet28a我已经用EcorI和BamH I双酶切了露出了粘性末端,我不知道胶回收产物是否也用EcorI和BamH I双酶切露出粘性末端后再与双酶切后的pet28a连接?还是胶回收产物不用双酶切直接与双酶切后的pet28a连接呢? 求解答,既然可以这样连接,那连接pMD-18T的目的是什么呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happydove

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
95846713(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-05 14:19:57
目的片段胶回收后 再双酶切 然后再回收  最后和酶切好的载体连接
5楼2014-10-29 17:06:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lpzl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
95846713(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-29 08:49:46
直接连吧。。。PCR产物双酶切后,与同样酶切后的pET28a载体直接连接吧,我一直都是这么干的。。。
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2014-10-29 08:27:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

95846713

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lpzl at 2014-10-29 08:27:47
直接连吧。。。PCR产物双酶切后,与同样酶切后的pET28a载体直接连接吧,我一直都是这么干的。。。

谢谢
3楼2014-10-29 15:43:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hjyxm

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
95846713(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-05 14:19:46
pMD-18T是克隆载体,可以让你的目的片段复制得更多,从而更容易与表达载体相连;理论上来说,目的片段的胶回收产物可以和表达载体直接连接。
好好工作!
4楼2014-10-29 16:01:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +3 钢铁大炮 2026-03-24 3/150 2026-03-24 22:03 by bingxueer79
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分,一志愿四川大学,诚心求调剂 +15 吃吃吃才有意义 2026-03-19 16/800 2026-03-24 19:51 by 了了了了。。
[考研] 求调剂 +5 林之夕 2026-03-24 5/250 2026-03-24 17:16 by dick_runner
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料,材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 7/350 2026-03-24 11:23 by 种大树
[考研] 求材料,环境专业调剂 +3 18567500178 2026-03-18 3/150 2026-03-23 23:50 by 热情沙漠
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 303求调剂 +4 元夕元 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:00 by macy2011
[考研] 316求调剂 +7 梁茜雯 2026-03-19 7/350 2026-03-23 16:21 by lingjue
[考研] 350求调剂 +6 weudhdk 2026-03-19 6/300 2026-03-23 15:47 by tangyuan0840221
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 一志愿华中科技大学071000,求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +4 llllkkkhh 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:24 by JourneyLucky
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 一志愿福大288有机化学,求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
信息提示
请填处理意见