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spirit_free

金虫 (小有名气)

[求助] 提取的质粒总是有两条带,求原因 已有3人参与



如上图是我提取的质粒的电泳图,每次提取之后除了比较亮的 目的条带,电泳图上总是出现一条比较浅的带,每次提都会出现,求各位帮忙分析下原因。用的是DL5000的marker,由上到下分别是5,000 bp、3,000 bp、2,000 bp、1,500 bp、1,000 bp、750 bp、500 bp、250 bp、100 bp。我的载体加目的片段的总长度大约是5023bp。如果用提取的质粒去测序,对测序结果会不会有影响
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wei521903

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-09-28 18:47:17
大的条带是抽质粒过程中抽断了的,送测序结果不会有影响。
2楼2014-09-28 17:14:04
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张冰宝

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-09-30 21:56:40
提质粒一般都会出现不同的构象,正常,不影响
3楼2014-09-29 09:09:34
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spirit_free

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 张冰宝 at 2014-09-29 09:09:34
提质粒一般都会出现不同的构象,正常,不影响

好的,谢谢回答~
4楼2014-09-29 09:55:21
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cuihao102

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-09-30 21:56:47
正常,质粒三种形态,超螺旋、线性、开环,质粒提的质量挺好,没有蛋白、总DNA和RNA
5楼2014-09-29 10:04:04
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