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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 提取质粒后，分光测定4000ng/μl.跑电泳无质粒条带，但有小于200bp单一带。
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hanyueguang

金虫 (小有名气)

[求助] 提取质粒后，分光测定4000ng/μl.跑电泳无质粒条带，但有小于200bp单一带。 已有4人参与

提取质粒后，用分光测定达到4000ng/μl.跑电泳发现无质粒条带，但有小于200bp的单一条带。如果质粒降解也应该是弥散的啊，（所以怀疑是RNA，尽管提取时在buffer1中加了RNA酶）。但是我的质粒跑哪去了

提取质粒后，分光测定4000ng/μl.跑电泳无质粒条带，但有小于200bp单一带。
电泳质粒无带.jpg
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1楼 2014-05-07 11:23:16
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
silicare: 金币+3, MolEPI+1, 谢谢参与 2014-05-12 08:16:23
这就是RNA，质粒没有提出来
这种情况尤其见于全手工作业，没有吸附柱的情况。

要注意，RNaseA并不能把RNA切成NTP！
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5楼2014-05-07 19:07:18
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普通回帖

for5

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你od260和280各是多少?rna比dna容易降解

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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操蛋的XX
2楼2014-05-07 11:58:37
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心碎

新虫 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-05-07 15:26:14
加了RNA酶的话，应该就没有RNA存在了，而且RNA本身也不稳定，所以是RNA的可能很小，很可能是超螺旋结构的质粒，个人观点。
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实验顺利，其他都是浮云
3楼2014-05-07 14:28:59
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zep616745243

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这样的质粒浓度是怎么提出来的，有点小吓人，200bp的质粒条带 木有见过，不知道你的条带是多大的
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只有不断地失败才会成功
4楼2014-05-07 16:41:20
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meng_xu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是RNA，你的质粒嘛，看起来应该是没有的，不知道你怎么提取的，如果是P1+2+3然后酒精沉淀的传统做法，RNA酶消化建议要大于30分钟

而且，你测4ug／ul的浓度，260/280是多少呢？
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6楼2014-05-08 05:08:47
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