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hanyueguang

金虫 (小有名气)

[求助] 提取质粒后,分光测定4000ng/μl.跑电泳无质粒条带,但有小于200bp单一带。 已有4人参与

提取质粒后,用分光测定达到4000ng/μl.跑电泳发现无质粒条带,但有小于200bp的单一条带。如果质粒降解也应该是弥散的啊,(所以怀疑是RNA,尽管提取时在buffer1中加了RNA酶)。但是我的质粒跑哪去了

提取质粒后,分光测定4000ng/μl.跑电泳无质粒条带,但有小于200bp单一带。
电泳质粒无带.jpg
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for5

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你od260和280各是多少?rna比dna容易降解

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
操蛋的XX
2楼2014-05-07 11:58:37
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心碎

新虫 (小有名气)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-05-07 15:26:14
加了RNA酶的话,应该就没有RNA存在了,而且RNA本身也不稳定,所以是RNA的可能很小,很可能是超螺旋结构的质粒,个人观点。
实验顺利,其他都是浮云
3楼2014-05-07 14:28:59
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zep616745243

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这样的质粒浓度是怎么提出来的,有点小吓人,200bp的质粒条带 木有见过,不知道你的条带是多大的
只有不断地失败才会成功
4楼2014-05-07 16:41:20
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+3, MolEPI+1, 谢谢参与 2014-05-12 08:16:23
这就是RNA,质粒没有提出来
这种情况尤其见于全手工作业,没有吸附柱的情况。

要注意,RNaseA并不能把RNA切成NTP!
5楼2014-05-07 19:07:18
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meng_xu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是RNA,你的质粒嘛,看起来应该是没有的,不知道你怎么提取的,如果是P1+2+3然后酒精沉淀的传统做法,RNA酶消化建议要大于30分钟

而且,你测4ug/ul的浓度,260/280是多少呢?
6楼2014-05-08 05:08:47
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