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childchou

银虫 (小有名气)

[求助] 胶回收时跑不出条带 已有18人参与

小弟做基因克隆,PCR后跑电泳观察,上样量4ul,跑出的条带很亮,而且片段大小正确1000bp,然后进行胶回收,把4管PCR产物混一起,每个胶孔上样40ul,跑电泳后发现目的片段处没有条带,反而在100-200bp大小处出现很亮的条带,应该是引物二聚体,想请教下各位大神,这是为什么呀!用的染料是goldview,胶染法。急急急急急!!!!!
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boomshakalaka
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happydove

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

楼主  把所有帖子看完,才大概明白了你的意思
跑了4ul是有条带,而且很好。再跑40ul的就没有条带,所以根本也没有胶回收。
还有一点不明白的是你PCR体系是20ul,是做了几管,混合后跑胶的吗?
这个实验不难,与其纠结,不如再做一遍,建议扩大体系做,或者还是以前体系做了,先混合好,再跑胶看结果。
祝你顺利!
62楼2014-09-11 13:15:58
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普通回帖

tangjiguoice

木虫 (著名写手)

★
childchou(金币+1): 谢谢参与
得金币了,说声谢谢!
2楼2014-09-07 21:09:20
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childchou

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by tangjiguoice at 2014-09-07 21:09:20
得金币了,说声谢谢!

给点建议啊!亲
boomshakalaka
3楼2014-09-07 21:18:27
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★
childchou(金币+1): 谢谢参与
4楼2014-09-07 21:20:44
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人偶骑士

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-09-08 16:19:12
换EB试试,我之前用其它染色剂也出现了很多问题,换了EB就没了
道之所在,虽千万人吾往矣!
5楼2014-09-07 21:27:07
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6楼2014-09-07 21:29:14
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祝福
7楼2014-09-07 21:35:25
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8楼2014-09-07 21:46:44
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9楼2014-09-07 21:57:51
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10楼2014-09-07 21:57:56
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