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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 胶回收时跑不出条带
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kkcs2006

木虫 (知名作家)
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2014-09-09 14:06:08
不懂生物相关的。帮顶领金币，谢谢楼主。
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上善若水大智若愚
31楼2014-09-09 00:12:19
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531271452
32楼2014-09-09 00:37:53
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childchou

银虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by bwangel at 2014-09-08 08:17:58
不用EB，胶回收应该非常亮的，如果GV看不见就重弄吧，估计是你提取的问题

PCR体系是20ul的，跑完pcr后吸4ul 跑胶看下，发现条带很亮而且大小正确，然后就把剩下的混在一起，放到大孔胶中跑，每个孔大概加了40ul，然后电泳玩后，就没有发现在目的片段大小处的条带，而且出现了很亮的引物二聚体条带。
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boomshakalaka
33楼2014-09-09 09:53:46
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childchou

银虫 (小有名气)
引用回帖:
22楼: Originally posted by 1066479423 at 2014-09-08 10:48:24
你意思是回收前有条带，回收后没有条带吗？你这个写的有点看不懂

开始加4ul跑验证下发现条带，然后就把剩下的一起加一起跑胶回收，发现没有条带了，而且出现了很亮的引物二聚体条带
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boomshakalaka
34楼2014-09-09 09:55:27
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childchou

银虫 (小有名气)
引用回帖:
25楼: Originally posted by miaoshuang at 2014-09-08 11:22:58
PCR产物混在一起是不对的，最好不要混在一起。另外，混在一起不会导致PCR产物没有，如果没有只说明你根本没有PCR到目的片段，你可以扩大一下体系试试

为什么不能混在一起呀，我们之前一直是这样干的！哈哈，如果是没有p出来的话，为什么之前4ul的能跑出来呢，大神快回复
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boomshakalaka
35楼2014-09-09 10:01:05
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jing0813jing
祝福
36楼2014-09-09 10:58:23
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497346748
37楼2014-09-09 11:10:54
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意萧02

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
childchou(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-09 14:07:15
这跟染料没多大关系吧，我也出现这个问题，回收后目的条带不见了，经个人分析，可能是酶和引物的缘故比较大，我是换了酶，重设了引物后就可以了

[ 发自小木虫客户端 ]
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38楼2014-09-09 11:42:28
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菲儿fanger
39楼2014-09-09 11:51:50
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qapollo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
childchou(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-09 14:07:38
你再扩一次就好了，不用纠结于这种事情。也许是你的操作出现了错误，也许是样品时间长了发生了降解。按照之前的步骤再扩一次就能知道到底是不是有问题了。
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40楼2014-09-09 13:12:28
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